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  • 發布時間:2023-02-15 12:23 原文鏈接: 核酸疫苗的應用介紹

    1偽狂犬病病毒(PRV) 將編碼PRVgC或gD基因的質粒DNA免疫豬,能誘導保護性抗體的生成和細胞免疫的產生;將編碼gB、gC、gD的多種質粒DNA混合使用,對引導免疫反應更有效

    2豬流感病毒(SIV [2]  ) Mackling等(1998)的試驗結果表明,編碼HⅣ1株的血凝素(HA)和核衣殼蛋白(NP)質粒DNA用金顆粒包裹,以基因槍轟擊豬的表皮進行免疫后,HA質粒DNA能使豬產生粘膜免疫反應而對流感病毒的攻擊具有抵抗力,DNA疫苗引起的免疫反應與滅活疫苗相當。

    3 豬呼吸與繁殖綜合征病毒(PRRS) PRRS基因片段ORF5編碼的主要囊膜糖蛋白GP5是該病毒的3個主要結構蛋白之一。含有ORF5基因質粒DNA能誘導豬抗GP5特異性中和抗體的產生;且免疫豬的外周血單核細胞在GP5重組蛋白存在時能夠發生轉化反應,顯示了GP5特異性細胞免疫的產生(Pirzadeh B等,1998)。Meng(2000)將GP5基因克隆入巨細胞病毒(CMV)早期啟動子的控制之下構建成真核表達質粒而制備出DNA疫苗,用其免疫仔豬后可誘導抗體的產生,實驗室攻毒后顯示出良好的保護效果。

    4口蹄疫病毒(FMDV) 將FMDV全長基因組的cDNA克隆到質粒,并去除其編碼核衣殼蛋白VP1的細胞結合部位的DNA序列,構建成質粒DNA以肌肉或皮內注射,初次免疫后2~4周,可使所有的豬都產生特異的病毒中和抗體,攻毒試驗中呈現部分保護作用

    5豬瘟病毒(CSFV) 余興龍等(2000)構建了CSFV主要保護性抗原E2基因4種不同的真核表達質粒。小鼠免疫試驗結果表明,E2基因上不同的功能區對基因疫苗的免疫應答有很大影響,有信號肽序列的E2基因可誘導特異性的免疫反應,且無跨膜區序列的E2基因所誘導的免疫應答反應比有跨膜區序列的強,而無信號肽序列的E2基因所誘導的免疫應答反應比有跨膜區序列的強,而無信號肽序列的E2基因則不能誘導產生CFSV特異性的免疫反應。攻毒保護試驗結果表明,免疫家兔最少可抵抗10個最小感染劑量(MID)的豬瘟兔化弱毒苗(HCⅣ)的攻擊;免疫豬可抵抗致死劑量的CFSV石門株強毒的攻擊。

    6牛呼吸道合胞體病毒(BRSV) 用BRSV G基因構建的DNA疫苗,以無針方式免疫小牛時比皮內或肌肉注射引起的免疫反應強烈。

    牛皰疹病毒(BHV) 用表達BHV?1 gD基因的質粒DNA疫苗免疫牛,能產生很高的中和抗體;攻毒試驗后發現,免疫組比非免疫組的病毒排放量明顯減少(schrijver R S等,1997)。此疫苗通過肌肉或皮內注射均可引導免疫反應的產生。但皮內注射引起的免疫反應更強

    7牛病毒性腹瀉病毒(BVDV) 以表達BVDV1型主要糖蛋白E2的質粒DNA肌肉注射小牛,可產生病毒中和抗體和抗原特異的細胞增殖反應;免疫后16周進行攻毒試驗,發現免疫牛能產生針對BVDV1型和2型的血清中和抗體強烈的記憶抗體反應,對牛有部分免疫保護作用

    8新城疫病毒(DNV) Sakaguchi等(1996)將NDV F基因插入質粒載體,F基因的表達受巨細胞病毒早期增強子和雞β?肌動蛋白啟動子控制。1周齡試驗雞肌肉內注射重組質粒后,有2/5注射線性質粒的雞和4/5注射線性質粒與脂質體轉染劑混合物的雞產生了高水平針對F蛋白的抗體,而注射閉環狀質粒的雞不能產生抗體。免疫9周后,體內有抗體的試驗雞都能抵抗致死劑量NDV強毒的攻擊。

    9雞傳染性喉氣管炎病毒(ILT) 將分別構建的含有雞傳染性喉氣管炎病毒王崗株gB、gC和gD基因的重組真核表達質粒及空載體質粒分組注射雛雞,攻毒后觀察免疫保護效果。結果表明,重組質粒誘導了免疫應答,免疫保護率達到79%,該基因疫苗可以作為預防ILV的1個補充。

    10禽流感病毒 Robinson等(1993)最先將DNA疫苗用于雞,以編碼禽流感病毒H7N7株血凝素(HA)基因的質粒(DNA)由不同途徑(靜脈、腹腔、皮下注射)免疫3周齡雞,可對致死劑量的H7N7株病毒鼻內攻擊產生50%的保護。Fyna等(1993)為了研究DNA疫苗對雞最有效的免疫途徑,將100~200 μg編碼H7?HA的質粒DNA通過靜脈、肌肉、皮下注射、點眼、囊內、滴鼻等方式免疫3周齡雞。4周后進行第2次免疫。第6周,用致死劑量的H7N7攻擊,免疫雞的存活率達10%~63%,而對照組的存活率只有2%。


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