分子量與分子量分布照分子排阻色譜法(通則0514)測定。
供試品溶液取本品適量(約相當于鐵50mg),加4mol/L磷酸二氫鈉溶液2ml,搖勻,靜置過夜,加水至10ml,濾過,取續濾液,即得。對照品溶液、系統適用性溶液(1)、系統適用性溶液(2)色譜條件、系統適用性要求與測定法見右旋糖酐鐵分子量與分子量分布項下。限度右旋糖酐的重均分子量(M)應為5000~7500,分布系數D(M。/Mn)應小于1.8。pH值應為5.2~6.5(通則0631)。苯甲醇照高效液相色譜法(通則0512)測定供試品溶液精密量取本品1ml,置25m量瓶中,用水稀釋至刻度,搖勻。
對照品溶液取苯甲醇約10mg,精密稱定,置25ml量瓶中,加水溶解并稀釋至刻度,搖勻色譜條件用辛基硅烷鍵合硅膠為填充劑;以甲醇-乙腈-水(25:35:40)為流動相;檢測波長為258m;進樣體積10l系統適用性要求苯甲醇峰與相鄰峰之間的分離度應符合要求測定法精密量取供試品溶液與對照品溶液,分別注人液相色譜儀,記錄色譜圖。限度供試品溶液色譜圖中如有苯甲醇峰,按外標法以峰面積計算,每1ml含苯甲醇應為標示量的80%~120%。氯化物取本品1ml,照右旋糖酐鐵項下的方法檢查,與標準氯化鈉溶液5.0m制成的對照液比較,不得更濃(0.5%)。重金屬取本品2ml,照右旋糖酐鐵項下的方法檢查,含重金屬不得過百萬分之十五。砷鹽取本品1ml,照右旋糖酐鐵項下的方法檢查,含砷鹽不得過0.0002%。注射部位未吸收Fe含量供試品溶液和對照溶液的制備取體重1.5~2.5kg健康家兔2只,剪去后腿內側的毛消毒注射部位,自半腱肌遠側末端插入針頭,穿過縫匠肌注入股內肌中,每只家兔一側后腿注射本品,另一側作為對照,劑量按每1kg體重注射0.4ml(每1ml含Fe25mg)或0.2ml(每lml含Fc50mg)。給藥7天后,處死動物,切開給藥側后腿皮膚。仔細檢查注射部位,注射部位肌肉不能有暗褐色沉積,沿筋膜板不能有滲跡,如有上述現象,則判為不符合規定;注射部位肌肉有輕微著色的則進行如下試驗。
取出注射部位呈色的股內肌;對照側后腿,取出與給藥側后腿相應部位與大小的股內肌,分別勻漿后,移至1000ml燒杯中,加2mol/L氫氧化鈉溶液75ml和水適量,使沒過肌肉,加蓋煮沸至無固體物存在,放冷,小心加硫酸50ml,加熱至沸,分次滴加硝酸約10ml,至無炭化物出現,加熱除去過量硝酸,放冷,轉移至250ml量瓶中,用水稀釋至刻度,搖勻,分別作為供試品溶液與對照溶液。標準曲線的制備精密量取鐵單元素標準溶液(每1ml中Fe100g)0ml、0.5ml、1.0ml、2.0ml、3.0ml,分別置100ml量瓶中,加20%枸櫞酸溶液10ml、巰基乙酸1ml,搖勻,滴加濃氨溶液至紫紅色不再加深,用水稀釋至刻度。以0管為空白,照紫外可見分光光度法(通則0401),在530nm的波長處測定吸光度,以含鐵量(pg)與相應的吸光度計算直線回歸方程。測定法精密量取供試品溶液和對照溶液各5ml,分別加硫酸3ml,加熱至發煙,加硝酸適量,繼續加熱至溶液呈無色,放冷,加水20ml,煮沸3分鐘,放冷,加20%枸櫞酸溶液l0ml、巰基乙酸1ml,滴加濃氨溶液至紫紅色不再加深,轉移至100ml量瓶中,用水稀釋至刻度,分別作為供試品測定溶液與對照測定溶液,以標準曲線項下0管為空白,照紫外-可見分光光度法(通則0401),在530nm的波長處分別測定注藥腿肌的吸光度A樣與對照腿肌的吸光度A對。由直線回歸方程查得Fe樣和Fe對的含量,求出平均值,按下式計算: 注射部位未吸收Fe含量%=Fe樣一Fe×50×100%注射量(Fe)注射部位未吸收Fe含量不得大于20%。過敏反應取本品,用氯化鈉注射液稀釋制成每1ml中含2mg(按Fe計)的溶液,依法檢查(通則1147),應符合規定異常毒性取體重18~22g健康小鼠10只,分別自尾靜脈注射用氯化鈉注射液稀釋成每1m1中含鐵10mg的供試品溶液0.5ml,在5日內小鼠死亡數不得超過3只;如超過3只,需另取小鼠20只,重復試驗;合并2次實驗結果,小鼠死亡總數不得超過10只。細菌內毒素取本品,依法檢查(通則1143),每1mg中(按Fe計)含內毒素的量應小于0.50EU。其他除可見異物不檢查外,應符合注射劑項下有關的各項規定(通則0102)。