鑒別
(1)照薄層色譜法(通則0502)試驗供試品溶液取本品細粉適量(約相當于齊多夫定1g),加甲醇50ml,充分振搖后,濾過,取續濾液。對照品溶液取拉米夫定對照品與齊多夫定對照品,加甲醇溶解并稀釋制成每1ml中含拉米夫定1mg與齊多夫定2mg的混合溶液。色譜條件采用硅膠GFs4薄層板,以二氯甲烷-甲醇冰醋酸(90:10:3)為展開劑。測定法吸取供試品溶液與對照品溶液各10,分別點于同一薄層板上,展開,晾干,置紫外光燈(254nm)下檢視結果判定供試品溶液所顯兩個主斑點的位置和顏色應分別與對照品溶液相對應的主斑點相同。(2)在含量測定項下記錄的色譜圖中,供試品溶液兩主峰的保留時間應分別與齊多夫定和拉米夫定對照品溶液兩主峰保留時間一致以上(1)、(2)兩項可選做一項。
檢查
有關物質照高效液相色譜法(通則0512)測定供試品溶液取本品5片,置500m量瓶中,加水適量,充分振搖使片劑完全崩解,超聲使拉米夫定與齊多夫定溶解,用水稀釋至刻度,搖勻,濾過,精密量取續濾液5ml,置50ml量瓶中,用0.025mol/L醋酸銨溶液(pH4.0±0.1)-甲醇(95:5)稀釋至刻度,搖勻系統適用性溶液取齊多夫定雜質Ⅰ、胸苷與胸腺嘧啶對照品適量,加0.025mol/L醋酸銨溶液(pH4.0±0.1)-甲醇(95:5)溶解并稀釋制成每1ml中約含齊多夫定雜質I0.03mg、胸苷0.03mg與胸腺嘧啶0.06mg的溶液,作為對照品溶液(1)。另取齊多夫定對照品約33mg,置100ml量瓶中,加入對照品溶液(1)10ml,加0.025mol/L醋酸銨溶液(pH4.0士0.1)-甲醇(95:5)溶解并稀釋至刻度,搖勻,作為對照品溶液(2)。取拉米夫定雜質混合對照品1瓶(含胞嘧啶、尿嘧啶、拉米夫定、水楊酸及拉米夫定雜質Ⅰ~V),加入對照品溶液(2)3ml,超聲使溶解,搖勻。色譜條件用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑;以0.025mol/L醋酸銨溶液(用冰醋酸調節pH值至4.0士0.1)為流動相A,甲醇為流動相B,乙腈為流動相C,按下表進行梯度洗脫;流速為每分鐘1.0ml;檢測波長為270nm;柱溫為25℃C;進樣體積10l時間(分鐘)流動相A(%)流動相B(%)流動相C(%)0~15515~30039~4545~6系統適用性要求系統適用性溶液色譜圖中,拉米夫定雜質Ⅱ峰與拉米夫定峰的分離度應符合要求,拉米夫定峰與胸苷峰的分離度應不小于2.0,齊多夫定峰與齊多夫定雜質I峰的分離度應不小于2.0。測定法精密量取供試品溶液注入液相色譜儀,記錄色譜圖。限度供試品溶液色譜圖中如有雜質峰,按下式計算,各雜質峰的相對保留時間、校正因子、限度和歸屬見下表對保留校正限度化合物歸屬時間因子(%)胞嘧啶0.111.0拉米夫定尿嘧啶0.14拉米夫定拉米夫定雜質1.00.3拉米夫定拉米夫定雜質Ⅳ拉米夫定拉米夫定雜質V拉米夫定胸腺嘧啶0.27591.5齊多夫定拉米夫定雜質Ⅱ1.00.2拉米夫定拉米夫定胸苷1.0齊多夫定拉米夫定雜質Ⅲ0.701.0拉米夫定水楊酸拉米夫定齊多夫定1.0齊多夫定雜質I1.101.01.0齊多夫定單個未知雜質1.00.5齊多夫定拉米夫定相關雜質總量0.6齊多夫定相關雜質總量A拉米夫定的相關雜質(%)100%式中Au為供試品溶液色譜圖中拉米夫定相關的單個雜質峰面積Am為供試品溶液色譜圖中拉米夫定與拉米夫定相關雜質峰面積的和齊多夫定的相關雜質(%)AA12×f×100%式中Auz為供試品溶液色譜圖中齊多夫定相關的單個雜質 峰面積Arz為供試品溶液色譜圖中齊多夫定、齊多夫定相關雜質與其他未知雜質峰面積的和;f為校正因子。溶出度照溶出度與釋放度測定法(通則0931第二法)測定。溶出條件以0.1mol/L鹽酸溶液900ml為溶出介質,轉速為每分鐘75轉,依法操作,經30分鐘時取樣供試品溶液取溶出液適量,濾過,精密量取續濾液lml,置1oml量瓶中,用流動相稀釋至刻度,搖勻對照品溶液取齊多夫定對照品約33.4mg和拉米夫定對照品約16.7ng,精密稱定,置同一100ml量瓶中,加溶出介質溶解并稀釋至刻度,搖勻,精密量取5ml,置50ml量瓶中用流動相稀釋至刻度,搖勻色譜條件用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑;以0.025mol/L醋酸銨溶液(用冰醋酸調節pH值至4.0±0.1)-甲醇(80:20)為流動相,檢測波長為270nm;進樣體積10p測定法精密量取供試品溶液與對照品溶液,照高效液相色譜法(通則0512),分別注入液相色譜儀,記錄色譜圖。按外標法以峰面積分別計算每片中齊多夫定和拉米夫定的溶出量。限度均為標示量的80%,應符合規定。其他應符合片劑項下有關的各項規定(通則0101)。