鑒別
(1)在含量測定項下記錄的色譜圖中,供試品溶液主峰的保留時間應與對照品溶液主峰的保留時間一致。(2)本品的紅外光吸收圖譜應與對照的圖譜(光譜集223圖)一致。(3)本品顯鉀鹽鑒別(1)的反應(通則0301)。
檢查
吸光度取本品,精密稱定,加水溶解并定量稀釋制成每1ml中含1.88mg的溶液,照紫外-可見分光光度法(通則0401)測定,在280nm與325nm的波長處,吸光度均不得大于0.10;在264nm的波長處有最大吸收,吸光度應為0.80~0.88。有關物質照高效液相色譜法(通則0512)測定。臨用新制。供試品溶液取本品適量,加水溶解并定量稀釋制成每lml中約含4mg的溶液。對照溶液精密量取供試品溶液1ml,置100ml量瓶中,用水稀釋至刻度,搖勻。系統適用性溶液取青霉素系統適用性對照品適量,加水溶解并稀釋制成每1ml中約含4mg的溶液靈敏度溶液精密量取對照溶液適量,用水定量稀釋制成每1ml中約含1.0g的溶液。色譜條件用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑;以磷酸鹽緩沖液(取磷酸二氫鉀10.6g,加水至1000ml,用磷酸調節pH值至3.4)-甲醇(72:14)為流動相A,乙腈為流動相B,先以流動相A-流動相B(86.5:13.5)等度洗脫,待雜質E的第3個色譜峰(見參考圖譜)洗脫完畢后,立即按下表進行線性梯度洗脫;檢測波長為225nm;流速為每分鐘1.0ml;柱溫為34℃;進樣體積為20p時間(分鐘)流動相A(%)流動相B(%)86.513.586.564ta+39tg+5086.513.5tg:青霉素系統適用性對照品溶液中雜質E的第3個色譜峰的保留時間系統適用性要求系統適用性溶液色譜圖應與標準圖譜致;靈敏度溶液色譜圖中,主成分色譜峰峰高的信噪比應大于10測定法精密量取供試品溶液和對照溶液,分別注入液相色譜儀,記錄色譜圖。限度供試品溶液色譜圖中如有雜質峰,各雜質峰面積的和不得大于對照溶液主峰面積(1.0%),小于靈敏度溶液主峰面積的峰忽略不計。青霉素聚合物照分子排阻色譜法(通則0514)測定。臨用新制。供試品溶液取本品約0.4g,精密稱定,置10ml量瓶中,加水適量使溶解后,用水稀釋至刻度,搖勻。對照溶液取青霉素對照品適量,精密稱定,加水溶解并定量稀釋制成每1ml中約含0.1mg的溶液系統適用性溶液(1)取藍色葡聚糖2000適量,加水溶解并稀釋制成每1ml中約含0.1mg的溶液系統適用性溶液(2)取青霉素鉀約0.4g,置10ml量瓶中,加0.05mg/ml的藍色葡聚糖2000溶液溶解并稀釋至刻度,搖勻。色譜條件用葡聚糖凝膠G10(40~120m)為填充劑玻璃柱內徑為1.0~1.4cm,柱長為30~40cm;以pH7.0的0.1mol/L磷酸鹽緩沖液[0.lmol/L磷酸氫二鈉溶液-0.1mol/L磷酸二氫鈉溶液(61:39)為流動相A,以水為流動相B;流速為每分鐘1.5ml;檢測波長為254nm;進樣體積為100~2001系統適用性要求系統適用性溶液(1)分別在以流動相A與流動相B為流動相記錄的色譜圖中,按藍色葡聚糖2000峰計算,理論板數均不低于400,拖尾因子均應小于2.0,藍色葡聚糖2000的保留時間的比值應在0.93~1.07之間。系統適用性溶液(2)在以流動相A為流動相記錄的色譜圖中,高聚體的峰高與單體和高聚體之間的谷高比應大于2.0。對照溶液色譜圖中主峰與供試品溶液色譜圖中聚合物峰,與相應色譜系統中藍色葡聚糖2000峰的保留時間 的比值均應在0.93~1.07之間。以流動相B為流動相,精密量取對照溶液連續進樣5次,峰面積的相對標準偏差應不大于5.0%測定法以流動相A為流動相,精密量取供試品溶液,注入液相色譜儀,記錄色譜圖;以流動相B為流動相,精密量取對照溶液,注入液相色譜儀,記錄色譜圖。限度按外標法以青霉素峰面積計算,青霉素聚合物的量不得過0.08%。可見異物取本品5份,每份各0.625g,加微粒檢查用水溶解,依法檢查(通則0904),應符合規定。(供無菌分裝用)不溶性微粒取本品,加微粒檢查用水制成每1ml中含50mg的溶液,依法檢查(通則0903),每1g樣品中,含10m及10pm以上的微粒不得過6000粒,含25m及25m以上的微粒不得過600粒。(供無菌分裝用)結晶性、酸堿度、溶液的澄清度與顏色、干燥失重、細菌內毒素(供注射用)與無菌(供無菌分裝用)照青霉素鈉項下的方法檢查,均應符合規定