性狀
本品為黃色結晶性粉末;無臭,有引濕性;在日光下顏色變暗,在堿溶液中易破壞失效。本品在水中易溶,在甲醇或乙醇中略溶,在乙醚中不溶。比旋度取本品,精密稱定,加鹽酸溶液(9→1000溶解并定量稀釋制成每1ml中約含10mg的溶液,依法測定(通則●G(H)F24薄層板,用10%乙二胺四醋酸二鈉溶液(10mol/L氫1小時后備用0621),比旋度為-188°至-200°。
鑒別
(1)取本品約0.5mg,加硫酸2ml,即顯深朱紅色;再加水1ml,溶液變為黃色(2)照薄層色譜法(通則0502)試驗供試品溶液取本品,加甲醇溶解并稀釋制成每1ml中約含1mg的溶液對照品溶液取土霉素對照品,加甲醇溶解并稀釋制成每1m中約含1mg的溶液系統適用性溶液取土霉素與鹽酸四環素對照品,加甲醇溶解并稀釋制成每1m中各約含1mg的混合溶液色譜條件采用硅膠G(H)F24薄層板,以水甲醇二氯甲烷(6:35:59)為展開劑。測定法吸取上述三種溶液各1l,分別點于同一薄層板上,展開,晾干,置紫外光燈(365nm)下檢視。系統適用性要求系統適用性溶液應顯兩個完全分離的斑點。結果判定供試品溶液所顯主斑點的位置和熒光應與對照品溶液主斑點的位置和熒光相同3)在含量測定項下記錄的色譜圖中,供試品溶液主峰的保留時間應與對照品溶液主峰的保留時間一致。(4)本品的水溶液顯氯化物鑒別(1)的反應(通則0301)。以上(2)、(3)兩項可選做一項
檢查
酸度取本品,加水制成每1ml中含10mg的溶液,依法測定(通則0631),pH值應為2.3~2.9有關物質照高效液相色譜法(通則0512)測定供試品溶液取本品適量,加0.01mol/L鹽酸溶液溶解并稀釋制成每1ml中約含0.5mg的溶液對照溶液精密量取供試品溶液2ml,置100ml量瓶中用0.01mol/L鹽酸溶液稀釋至刻度,搖勻系統適用性溶液取4-差向四環素對照品適量,加0.01mol/L鹽酸溶液溶解并稀釋制成每1m中約含0.5mg的溶液;取土霉素對照品(約含3%的2-乙酰-2-去酰胺土霉素)適量,加少量0.lmol/L鹽酸溶液溶解,用水稀釋制成每lml中約含土霉素0.5mg的溶液;取上述兩種溶液(1:24)混合制成每1ml中約含4差向四環素20gg和土霉素480μg(約含2-乙酰-2-去酰胺土霉素14.5g)的混合溶液靈敏度溶液精密量取對照溶液2ml,置100ml量瓶中,用0.01mol/L鹽酸溶液稀釋至刻度,搖勻色譜條件用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑;以醋酸銨溶液[0.25mol/L醋酸銨溶液-0.05mol/L乙二胺四醋酸二鈉溶液-三乙胺(100:10:1),用醋酸調節pH值至7.5]乙腈(88:12)為流動相;檢測波長為280nm;進樣體積為10l。系統適用性要求系統適用性溶液色譜圖中,出峰順序為:4-差向四環素峰(與土霉素峰相對保留時間約為0.9)、土化鈉溶液調節pH值至7.0)10ml均勻噴在板上,平放晾干,110℃干燥霉素峰、2-乙酰-2-去酰胺土霉素峰(與土霉素峰相對保留時間約為1.1)。土霉素峰的保留時間約為12分鐘。4-差向四環素峰與土霉素峰之間的分離度應大于2.0,土霉素峰與2-乙酰-2-去酰胺土霉素峰之間的分離度應大于2.5。靈敏度溶液色譜圖中,主成分峰峰高的信噪比應大于10測定法精密量取供試品溶液與對照溶液,分別注人液相色譜儀,記錄色譜圖至主成分峰保留時間的4倍限度供試品溶液色譜圖中如有雜質峰,2-乙酰-2-去酰胺土霉素的峰面積不得大于對照溶液主峰面積的1.75倍(3.5%),其他各雜質峰面積的和不得大于對照溶液主峰面積(2.0%),小于靈敏度溶液主峰面積的峰忽略不計雜質吸光度取本品,加0.1mol/L鹽酸甲醇溶液(1→100)溶解并定量稀釋制成每1ml中含2.0mg的溶液,照紫外可見分光光度法(通則0401),于1小時內,在430nm的波長處測定,吸光度不得過0.50。另取本品,加上述鹽酸甲醇溶液溶解并定量稀釋制成每1ml中含10mg的溶液,在490nm的波長處測定,吸光度不得過0.20。水分取本品,照水分測定法(通則0832第一法1)測定含水分不得過2.0%