CPSA2014分會：抗體偶聯藥物的世界生物分析和PK／PD的挑戰

　　2014年4月16-18日，第五屆中國上海化學與藥物結構分析會議(CPSA Shanghai 2014)于在上海浦東淳大萬麗酒店召開。本屆會議的主題是“個性化藥物新時代：藥物研發的創新方法”。會議吸引到來自國際知名藥企、跨國大制藥公司、中國CRO、生物醫藥研究所和高校的高管、專家、學者220余人出席。在4月17日上午的分會中，舉行了以“抗體偶聯藥物的世界：生物分析和PK/PD的挑戰”為主題的研討會，來自Genentech的Ben-Quan Shen先生、Algorithme Pharma的Fabio Garofolo博士以及布法羅大學的Dhaval Shah博士分別帶來精彩報告。

　　

Genentech公司 Ben-Quan Shen先生

　　首先來自美國Genentech公司的Ben-Quan Shen先生介紹了《ADC發展的挑戰和對策》。

　　Ben-Quan Shen先生指出ADC ADME信息對于安全性測試和藥物相互作用評估是非常關鍵的，包括進行低水平和有效的小分子毒素試驗從而來了解未知產物性能例如安全性和DDI潛在性或ADC降解產物是否有細胞毒性或DDI潛在性。

　　ADC發展中所面臨的挑戰有ADC的創新/復雜的平臺和作為組分的獨特的分子，但是不同于SMD和mAb：多參數的優化（抗體、連接器、藥物、抗體藥物比）、ADCs混合物、每個單位有不同的療效/毒性關系以及測試系統/指導的缺乏；其次ADC的優先級是有限的，需要開發新的生物分析工具，且在管理方面缺乏小分子或大分子藥物發展模式的明確指導；再次在PK/ADME和分析/技術方面，生物測定復雜混合物，多個組分分析物的測定、放射性材料的高活性要求以及藥物成分是有效的小分子和可能有潛在的DDI等都是很大的挑戰。

　　Ben-Quan Shen先生提出了關于ADCs的關鍵ADME問題主要有：1、ADC在體外血漿中是否穩定且任何種間是否存在差異？2、血漿中主要的循環個體以及形成的代謝產物以及他們的豐度（ADC）？3、臨床相關的代謝產物以及豐度？4、ADC會形成什么，是否會在組織中累積？5、ADC/代謝產物主要的消除途徑以及是否會在分解代謝中造成器官損害？等等。

　　 Ben-Quan Shen先生在報告最后總結到ADC受到技術上以及工藝上的挑戰，十分復雜，發展受阻；一個獨特的并且定制的非臨床ADME策略可適用于小分子指導，并能應用于對T-DM1的臨床發展的評估和風險管理；這些策略的構思和實施可作為ADCs未來發展的基礎。Ben-Quan Shen先生介紹ADCs有大分子和小分子組成且要求的定制ADME方法不同于傳統的SMD ADME研究；ADCs一些新的物種更加復雜；非臨床的ADME研究對于臨床藥理學來說也是很有價值的，但是需要在對的時間進行對的研究；我們期望看到對這些數據的嚴格管理規范并希望制定廣泛的管理方針。

　　

Algorithme Pharma公司 Fabio Garofolo博士

　　來自Algorithme Pharma公司的Fabio Garofolo博士介紹了《應用LC-MS/MS進行的大分子定量的挑戰和解決方案：一個管理臨床前和臨床生物分析的熱門話題》。

　　Fabio Garofolo博士報告中主要介紹了ADC生物分析法和生物分析挑戰以及LCMS進行大分子分析，并示例說明。ADCs是典型的異構混合物是由共價結合的小分子細胞毒性藥物、多重位點的單克隆抗體以及合成連接器組成，ADCs的復雜結構性質要求創新的生物分析策略包括治療性蛋白的使用、小分子藥物以及ADCs特別的設計。而主要的挑戰則有ADC參考材料的不均一性以及體外ADC材料異質性的動力性質。

　　LCMS進行定量LM的優勢：

　　1、不需要高親和試劑（儀器代替反應試劑）；

　　2、統一的方法（可用于多個侯選物/母體）；

　　3、較大的線性動態范圍

　　4、較高的選擇性；

　　5、比LBA更快的方法；

　　6、更高的持久性；

　　7、通過管理更好的預期。

　　使用LCMS進行LM生物分析的方法通常是SRM中的一個或多個特定標簽的肽進行QQQ分析；缺點則是有時Triple Quads（低分辨率的儀器）不夠明確；其結果是這種方法有著高背景噪音和低靈敏性以及較高的LLQQ和不可接受的變化。

　　Fabio Garofolo博士最后總結到一個基因樣本制備程序，首先取樣10毫克，結合優質LC-HRMS參數，這種參數能達到總ADC濃度1.00μg/ml 的一個LLOQ；此研究中介紹的方法能用于通過琥珀酸耦合化學作用的ADC的共軛對的賴氨酸殘基的定量；一個與此類似的方法可用于其他共軛化學；蛋白消化為代替肽也可由酶而非胰島素來進行，當找不到合適的胰蛋白酶肽時，甚至可以化學性地進行此過程。總之，此研究有助于推動ADC定量研究走向一個簡單的分析平臺。

　　

布法羅大學 Dhaval Shah博士

　　來自布法羅大學的Dhaval Shah博士介紹了《基于ADCs發展模式》。

　　Dhaval Shah博士報告內容主要包括了PK/PD模型對ADC項目的支持，ADCs的PK/PD模型的應用：候選者的選擇、臨床前到臨床的轉化、體內分布的獲知以及引導發現和發展。

　　ADC是一種異構形式由一種到多種細胞毒素藥物組成通過生化連接器連接到單克隆抗體（mAb），連接到單克隆抗體（mAb）的有效載荷數可以表示為藥物抗體比（DAR），除去不同的DARs，ADC的生物轉化通過有效載荷、連接器和或mAb排列組合的變化形成不同的其他分析物。

　　成功的PK模式發展的主要障礙就是關于驅動有效性和安全性知識的缺乏。