1、標本
取患者腦脊液或刺破皮膚出血瘀斑取滲出物作涂片或培養。血液標本作培養。帶菌者檢測可取鼻咽拭子。
2、直接涂片鏡檢
腦脊液離心沉淀后，取沉淀物涂片，革蘭染色后鏡檢。或消毒患者皮膚出血瘀斑處皮膚，用無菌針頭挑破瘀斑取滲出物制成涂片，革蘭染色后鏡檢。如鏡下見到中性粒細胞內、外有革蘭染色陰性雙球菌時，即可作出初步診斷。
3、分離培養與鑒定
血液與腦脊液標本在血清肉湯培養基中增菌后，接種到巧克力色血瓊脂平板上，置于含5%～10%CO2的環境中孵育。挑取可疑菌落涂片鏡檢，并作生化反應（表13-1）及型特異性多價血清的凝集試驗鑒定。
4、生化鑒定
主要通過氧化酶、糖類發酵以及培養生長特點進行。
①細菌形態呈腎形；
②氧化酶試驗陽性；
③觸酶試驗陽性；
④分解葡萄糖、麥芽糖產酸不產氣；
⑤莢膜多糖抗原直接凝集試驗。