臨床開展凝血檢測對疾病的診斷具有重要意義。血凝儀檢測除了能對出血疾病進行篩選和診斷外,還可用于血檢前狀態的檢查,故檢測結果的準確性至關重要。所以保證實驗結果準確性至關重要,在凝血檢測過程中,有一些操作者必須注意的事項,否則就會導致檢測結果出現偏差,甚至危及生命,現介紹如下。
一.采集標本需注意事項
1.采集血標本前,要讓病人處于空腹和平靜狀態,情緒激動、劇烈運動和神經緊張會引起血小板數增多,血小 板、凝血和纖溶活性的增強。
2.采血時,止血帶不應扎得太緊或時間太長,因長時間結扎會使因子Ⅷ和組織纖溶酶源激活劑(t-PA)釋放和活化。
3.要用一次性塑料注射器和塑料試管,以減少血小板和凝血因子的活化,進針要順利,第一支注射器采血2ml應棄去再換另一支注射器取實驗用血,這樣可以避免混入組織液,血液與抗凝集要充分混勻;否則影響凝血檢測的準確性。
二.標本的儲存和運輸
4.標本采集后打入塑料或硅化的試管內,并且立刻塞緊蓋子,否則會有CO2揮發,pH增高,影響APTT、PT延長。
5.要及早分離血漿,最好在2h內分離出來,對于當前不能做的標本,可將血漿分離分裝在帶塞子的塑料管內,冷凍在-20℃的冰箱內,對需要存較長時間的標本冰凍存于-80℃的冰箱內,冰凍的血漿融化時不能靜置于室溫中逐漸融化,這樣會有纖維蛋白遇冷沉淀蛋白析出,應放置37℃水浴中輕輕搖動,使其迅速溶化。
6.標本需要在室溫下運送,必須室溫運送,因低溫會損傷血小板,活化因子Ⅶ和因子Ⅺ,使PT、APTT結果縮短。必需低溫的標本要在4℃以下運送,以防止因子Ⅴ和因子Ⅱ降解。
三.試劑的選擇
7.抗凝劑 要用抗凝劑為0.109mol/L的檸檬酸鈉,它能有效地阻止因子Ⅴ和Ⅷ的活化,嚴格按1:9的比例抗凝,當HCT>55%或<25%時,應按如下公式重新核算抗凝劑的用量,抗凝劑量(ml)=0.00185×全血量(ml)×[100-HCT(%)]:不應使用變質的枸櫞酸鹽溶液,否則會使PT、APTT試驗結果偏低。
8.檢測試劑 按照儀器的性能選用儀器配套的試劑,進口儀器,選用進口配套試劑,否則結果不準確,復溶的試劑,最好是現用現配,否則復溶后放置時間越長,越容易影響結果的準確性,暫時不用的復溶試劑要及時放回冰箱內冷藏。
四.儀器設備
9.儀器狀態的好壞,直接影響實驗的結果,所以全自動凝血儀要放在避光、透風的室內,并且要保證室內溫度控制在25℃左右,開機前要做好準備工作,檢查儀器的各個部件,看是否有異常,做好每天的保養和維護,確保儀器的正常運行。
五.技術
10.要嚴格按照操作規程操作,熟練掌握實驗原理方法和步驟,做到熟能生巧,精益求精。
儀器狀態的好壞,直接影響實驗結果,故血凝儀要放在避光、透風的室內,并且要保證室內溫度控制在25度左右,開機前做好準備工作,檢查儀器的各個部件,看是否有異常,做好每天的保養和維護,確保儀器的正常運行。
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