活體電穿孔法(in vivo electroporation) 是將外源基因通過電場作用，導入動物目標組織或器官。由于這種方法能有效導入外源基因，可在多種組織器官上應用,并且效率較高。活體電穿孔法的原理很簡單,在直流電場作用的瞬間,細胞膜表面產生疏水或親水的微小通道105～115μm ,這種通道能維持幾毫秒到幾秒,然后自行恢復。在此期間生物大分子如DNA 可通過這種微小的通道進入細胞 。近年來活體電穿孔法用于轉基因研究的報道不斷增多,在基因方面的優勢也日趨顯著,是一種很好的活體基因導入方法。
到目前為止,非病毒載體的活體基因導入方法有直接注射法、脂質體法、基因槍法、電穿孔法等。每一種方法都有其各自的特殊性,因此很難將這幾種方法進行簡單的比較。
直接注射法：可將外源基因直接注射到靶位點或血管中,但此種方法不適合以肌肉作為靶器官,它的外源基因表達效率極低,僅為電穿孔法的百分之一。
脂質體法：活體基因轉移法中脂質體法更適宜較大面積組織的基因導入,但無法避免DNA濃度變低,在出血的情況下會使本來不高的DNA濃度更加降低,往往造成基因導入效率低。
基因槍法：適合于DNA較易接觸到的質地較堅韌的組織如皮膚,而視網膜、胚胎和禽類的胚盤等組織會由于機械刺激和出血造成器質性損傷或發育停滯,因而不能用基因槍法完成。DNA包裹的金屬顆粒從基因槍發出到達組織表面大多只幾百微米的距離,較深層的組織不易操作, 表達效率也較低。
Muramatsu報道在材料一致的情況下,電穿孔法的基因導入和表達效率明顯高于其它方法,而且電穿孔法適合多種組織的操作 。
文章鏈接：儀器設備網 https://www.instrumentsinfo.com/technology/show-3067.html
