【摘要】 目的: 探討不同乙肝感染模式的患者與HBV-DNA定量結果進行對比分析。方法: 采用ELISA方法檢測乙肝病毒血清標記物, 熒光定量PCR (FQPCR) 檢測HBV-DNA, 比較二者之間的關系。結果: HBsAg、 HBeAg、 HBcAb陽性組和HBsAg、 HBeAg陽性組 HBV-DNA檢出率較高, 分別為96.61%和100%。HBsAg、 HBeAg、 HBcAb陽性組HBV-DNA含量平均水平為3.86×108, HBsAg、 HBeAg陽性組HBV-DNA含量平均水平為1.73×108; HBsAg、 HBeAb、 HBcAb陽性組和HBsAg、 HBcAb陽性組檢出率也較高, 達45% 以上, HBV-DNA含量平均水平分別為1.30×107和1.31×106。結論: FQPCR檢測HBV-DNA能準確地反映體內的HBV真實感染和復制情況, 在乙肝的診斷和治療中, 不能單憑兩對半的檢測, 同時應做HBV-DNA的定量測定。
【關鍵詞】 HBV-DNA ELISA FQPCR
乙型肝炎病毒是一種嚴重危害人類健康的傳染病, 它是由乙肝病毒(HBV)感染引起的, 我國是乙肝攜帶者高于人群的10%。急性乙肝中有20%會轉為慢性乙肝, 進而可能發展為肝硬化和肝癌, 因此, 準確、 迅速的診斷對乙肝的治療和預后極為重要。FQPCR技術融合了PCR技術和DNA探針雜交技術的優點, 直接探測PCR過程中熒光信號的變化, 而且整個實驗過程在完全封閉的狀態下進行, 不需要PCR的后處理和電泳檢測, 具有快速、 準確、 特異等優點。我們對本院321例不同乙肝感染模式的患者與HBV-DNA定量結果進行了實驗對比分析。
1 材料和方法
1.1 材料 321份血清標本均來自2006-01/2007-07我院門診及住院患者。熒光定量PCR系統購自博日公司; HBV-DNA診斷試劑盒購自深圳匹基公司; HBV血清標志物ELISA診斷試劑盒購自英科新創公司。
1.2 方法 血清標本的采集, 采用滅菌的一次性帶蓋塑料管, 清晨空腹抽取靜脈血5 mL, 離心分離血清, -20℃保存, 不超過7 d進行FQPCR。
1.3 實驗分組 用ELISA法分別對321例血清進行HBV兩對半檢測(血清標記物HBsAg 、 HBsAb、 HBeAg、 HBeAb、 HBcAb, 分別編號為1、 2、 3、 4、 5; (+)為陽性, (-)為陰性), 并依據檢測結果進行分組。分組如下: A: 1(+)、 3(+)、 5(+); B: 1(+)、 4(+)、 5(+); C: 1(+)、 3(+); D: 1(+)、 5(+) ; E: 2(+)、 4(+)、 5(+); F: 2(+)、 5(+); G: 4(+)、 5(+); H: 4(+); I: 5(+); J: 全(-)。
2 結果
2.1 熒光定量結果判斷標準 HBV-DNA定量以1×103拷貝/L為判斷陽性的標準, <1×103拷貝/L為陰性, >1×103拷貝/L判為陽性。
2.2 定量結果比較 HBV感染血清標志物各組合模式與HBV-DNA定量結果的比較(表1)。
表1 321例ELISA檢測結果與HBV-DNA定量結果的比較(略)
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