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  • 發布時間:2022-03-19 20:42 原文鏈接: 關于免疫共沉淀的簡介

      免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation)是以抗體和抗原之間的專一性作用為基礎的用于研究蛋白質相互作用的經典方法,是確定兩種蛋白質在完整細胞內生理性相互作用的有效方法。免疫共沉淀具有經翻譯后修飾的,處于天然狀態的優點。

      免疫共沉淀(Co -Immunoprecipitation, Co-IP)是利用抗原和抗體的特異性結合以及細菌的Protein A或G特異性地結合到免疫球蛋白的Fc片段的現象開發出來的方法。其基本原理是,在細胞裂解液中加入抗興趣蛋白的抗體,孵育后再加入與抗體特異結合的結合于Agarose珠上的Protein A或G,若細胞中有與興趣蛋白結合的目的蛋白,就可以形成這樣一種復合物:“興趣蛋白—抗性蛋白抗體—Protein A或G—Agarose珠”,經變性聚丙烯酰胺凝膠電泳,復合物又被分開。然后經免疫印跡或質譜檢測目的蛋白。這種方法得到的目的蛋白是在細胞內與興趣蛋白天然結合的,符合體內實際情況,得到的結果可信度高。這種方法常用于測定兩種目標蛋白質是否在體內結合;也可用于確定一種特定蛋白質的新的作用搭檔。

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