血細胞分析儀是醫院進行血常規檢查的必備機器,不僅在世界各地,而且在我國各級醫院都得到了普及應用。它不但提高了實驗結果的準確性,還提供了許多實驗指標,對疾病的診斷和鑒別診斷起了重要的作用。本文就簡單地談談關于血細胞分析儀的幾個問題。
一、發展簡史
1947年美國科學家庫爾特(W.H.Coulter)發明了用電阻法計數粒子的ZL技術。1956年他又將這一技術應用于血細胞計數獲得成功,其原理是根據血細胞非傳導的性質,以電解質溶液中懸浮血細胞在通過計數小孔時引起的電阻變化進行檢測為基礎,進行血細胞計數和體積測定,這種方法稱為電阻法或庫爾特原理。
1962年,我國第一臺血細胞計數儀在上海研制成功。到了60年代未血細胞分析儀除可進行血細胞計數外,還可以同時測定HGB血紅蛋白。70年代,血小板計數儀問世。80年代,開發了白細胞分類(3分類及5分類)。
90年代,開發出了可對網狀紅細胞進行計數的血細胞分析儀,同時5分類及幼稚細胞檢測更成熟,并發展成為血細胞分析流水線。
二、如何選購血細胞分析儀
當前,在我國境內銷售的的血細胞分析儀品牌很多,給醫院的選購造成了一定的麻煩。如日本SYSMEX公司(東亞醫用電子株式會社)的血細胞分析儀系列、美國庫爾特公司(現已被貝克曼收購)的血細胞分析儀系列、日本光電公司的血細胞分析儀系列、美國丹能公司以及瑞典博爾醫療公司的血細胞分析儀系列。因此建議醫院購買時從以下幾個角度考慮:
1、實用性。醫院應該根據自身的能力和標本量來決定購買何種檔次的機器,不要盲目攀比,爭相購買高檔機器,從而造成儀器購置的浪費。
2、儀器性能。這是最關鍵的一個因素。不能完全相信廠家的宣傳,要多聽取專家意見和到友鄰單位了解。
3、價格比。衡量同檔次機器的價格。
4、售后服務。俗話說:救人如救火。對機器也是一樣,機器損壞待修時間過長會造成病人對醫院的信譽度下降,久而久之就會造成病人的流失。所以,機器的售后服務也是一個必須考慮的因素。
5、輔助設備、試劑、消耗品和零配件價格。
要建立請專家進行論證的制度,糾正過去由院長一人說了算的錯誤做法。
三、如何驗收血細胞分析儀
1、驗收前準備工作:仔細閱讀說明書;按說明書要求準備儀器的工作環境和相關的外部設備;成立驗收小組;擬定驗收計劃。
2、開箱:必要時請商檢局派人參加;開箱后按照裝箱單清點物品是否和裝箱單一致。
3、安裝:應該對安裝過程進行詳細的記錄。
4、驗收儀器的技術性能指標:
(1)測定儀器試劑的本底;
(2)檢測儀器的精密度:用高、中、低值新鮮血標本各測10次,計算X-S、 CV值,取20~30個標本隨機排列,各測3次,求出總重復性CV%,它代表批內精度、儀器穩定性、互染等因素的總和;
(3)互染率:取高、低兩個濃度全血(高、低值相差4~5倍),先測定高濃度3次,接著測低濃度3次,再測高濃度3次,計算高對低、低對高的互染率;
(4)線性:取全血標本,用鹽水稀釋相當于全血的90%、80%、70%……,測得RBC、WBC、HGB結果做y=a+bx,a接近于0,b接近于1;
(5)校準:應由廠家提供全血校準物(低檔儀器用校準顆粒及HGB校準液)進行校準;
(6)上述指標必須符合該儀器的出廠指標,才算驗收合格。由驗收小組成員、安裝工程師及設備科同志簽字后存檔。
四、如何對血細胞分析儀進行校準
儀器經使用一個階段后應該作一次全面的校準,因為儀器本身是個比較器。一旦儀器產生漂移將帶來分析誤差及不精密度,所以儀器應該經常定期校準。
1、儀器校準前準備:徹底清洗管道,去除管道中的殘留血液、吸附的蛋白和纖維等,然后測定試劑空白,本底必須符合要求。
2、校準物準備:檢查校準物是否在有效期內,外觀有無變質。從冰箱中取出后,必須平衡至室溫,輕輕混勻,小心打開瓶蓋,勿使血液濺出,分裝成兩瓶。
3、在儀器上測定校準物,連續測定11次。第1次結果棄置不用,將2至11次結果計算出XS,絕對誤差,相對誤差。
4、核對實測結果與校準物所示結果,檢查實測結果有無升高或下降的趨向性。
5、判斷校準結果:校準標準要求如下表1。(1)如果各參數的絕對值誤差和相對誤差小于一級要求,屬合格范圍,不須作任何校準。(2)如果參數大于一級要求,小于二級要求,可按說明書要求調整系數。當調整后,可再測定另一瓶全血標準物,理應達到小于一級要求水平。(3)如果結果大于二級要求,則需通知廠家派工程師修理或調整,為保證病人標本測試質量,該儀器應暫停使用。
表1 校 準 標 準 要 求
絕對誤差 相對誤差
一級要求 二級要求 一級要求 二級要求
WBC 0.1×109/l 0.4×109/l 1.25% 5%
RBC 0.03×1012/l 0.08×1012/l 0.7% 8.0%
HGB 1g/l 8g/l 0.78% 3.0%
HCT 0.8% 1.7% 2.0% 4.5%
MCV 1.0fl 8.0fl 1.18% 2.5%
PLT 6.0×109/l 20.0×109/l 2.7% 9.0%
MPV 0.50fl 8.0fl 5% 20%
五、使用血細胞分析儀的注意事項
為了保證使用血細胞分析儀得出的結果能夠盡量反映病人的真實情況,在使用時必須注意以下幾方面:
1、血樣:由于靜脈血受外界因素影響較小,成份比較穩定,檢測結果準確度高重復性好,因此除嬰兒外,建議取血者均應采用靜脈血。如果采集未梢血時,注意不可局部過度擠壓,避免血液中混入大量的組織液,而且易激活凝血系統產生局部凝血,導致檢測結果的誤差;第一滴血由于細胞成分不穩定應棄掉,用第二滴血進行檢測。
2、抗凝:使用拘櫞酸鹽抗凝劑時間過長易結晶,細胞形態易發生變化,影響計數結果的準確性;草酸鹽易使血小板產生凝集,并可使白細胞形態發生變化,影響計數結果及分類;而肝素抗凝過量易引起白細胞凝集和血小板減少;EDTA-2Na較EDTA-2K的可溶性低,血小板凝集的可能性大。因此國際血液學標準委員會(ICSH)1993年發表的文件中建議使用EDTA-2K作為血細胞分析儀的抗凝劑,用量為1.5~2.2mg/ml血。
3.采血后用塞子密閉,室溫保存不超過6小時。
4、稀釋:稀釋器、吸樣管要經過校準。吸血后吸樣管外的血液要完全擦干凈。血液稀釋后要盡快測定,否則易引起“稀釋性溶血”。
5、混勻:檢測前混勻很重要,如果無旋轉式混勻器應顛倒混勻至少8次。
6、試劑:血細胞分析儀對試劑的要求非常嚴格,要求有嚴格的滲透壓標準、穩定的導電率、高標準的純凈度以及對儀器管道和閥路無腐蝕作用。因此溶血劑、稀釋液及清洗劑等最好選用原廠配套產品。
7、白細胞分類:首先必須明確,迄今為止,世界上無論多先進的血細胞分析儀,進行的白細胞分類都只是一種過篩手段,并不能完全取代人工鏡檢分類。要堅決糾正有些單位用了血細胞分析儀就丟掉鏡檢的錯誤思想。
8、質量控制:血液分析必須建立嚴格的質量控制制度,才能保證結果的可靠性。
六、現代血細胞分析儀的主要進展
隨著高科技的引用和基礎醫學的發展,各種先進的血細胞分析測試技術被應用到血細胞分析儀上。1987年Coulter公司發明的VCS(Volume,V,體積;Conductivity,C,電導性;Scatter,S,光散射)技術可使血細胞未經任何處理,在與體內形態完全相同的自然狀態下得出檢測結果。而在SYSMEX的NE-8000和SF-3000血細胞分析儀中采用了阻抗和射頻技術聯合的白細胞分類法。進入90年代后,儀器的自動化程度增高(達到120份/小時);可進行多參數分析(高達30余項);精密度高(重復計數;保證微孔管清潔;取中段血;運動流式細胞計數原理;鞘流原理……);向5分類及鑒別幼稚細胞發展;準確度好,全面質量管理,保證儀器檢測可靠性;具有智能化,可對同一病人診斷的前后進行對比,提出綜合意見,確定診斷方向;更加注意保護操作人員的安全(SLS-Hb、自動混勻、進樣、吸樣針內外清洗等);向流水線發展,將血細胞分析儀、網織紅細胞計數儀、推片、染色機聯成流水操作線。
最后,再強調一下,堅決反對用了血細胞分析儀后就不進行鏡下復檢和分類的錯誤傾向。
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