MAS的全稱是:Multi-function Impurity Adsorption SPE,就是"多重機制雜質吸附萃取凈化法",該方法主要通過多官能化的復合吸附材料,將生物樣品中的主要干擾雜質吸附;同時將強水溶性的被測物質留在樣品溶液中,而達到凈化和富集的目的。在藥物代謝分析領域,開闊了一個全新的快速便捷并且有效去除基質干擾的新型方法。
SPE柱管形式和離心管形式是MAS法常用的兩種產品形式。
SPE柱管形式的使用流程如下圖:
將樣品上樣到預處理過的SPE柱;
在加入適當量的洗脫液,靜置片刻,同步完成蛋白沉淀與分析物的提取;
加壓,使洗脫液勻速流過柱子,接收全部流出液;
接收液進行后處理或直接檢測。
MAS還有離心管形式
將樣品及提取溶劑同時放入離心管中,震蕩或超聲提取;
加入SPE填料吸附凈化樣品基質干擾,離心后檢測目標物被留在了溶液里。
取上清液進行后處理或直接檢測。
與常規的SPE方法相比,MAS法有很多的優點,尤其在藥物代謝分析領域中血漿樣品一般都采用直接蛋白沉淀法和常規SPE法來進行樣品前處理,其中蛋白直接沉淀更多的偏重于血漿樣品中大分子蛋白的去除,與其相較,SPE可以更好的去除小分子蛋白
圖1是比較了蛋白直接沉淀,常規SPE及MAS方法處理過的牛血清空白樣品的色譜圖,由圖中可以看出,常規SPE處理過的血清樣品色譜圖2.5分鐘前的雜質峰更少,而在2.5分鐘后卻又有兩個明顯的色譜干擾峰。正是證明了SPE對于大分子物質去除的更好,而對于某些小分子蛋白卻無法徹底的清除。
圖1 MAS方法與常規SPE及蛋白直接沉淀法蛋白去除效果比較色譜圖
藍色為直接蛋白沉淀;綠色為HLB凈化;粉色為MAS柱管形式凈化;墨綠色為MAS離心管形式凈化
MAS方法的開發正是為了解決這一問題,可以看到,MAS方法處理過的樣品色譜圖在2.5分鐘后幾乎沒有任何干擾,而在2.5分鐘前的干擾峰也比直接蛋白沉淀方法有了明顯的減少。這是因為MAS方法同時結合了蛋白沉淀與SPE吸附,酸化乙腈既作為蛋白沉淀劑又等同于提取液,且方法簡單,快速,便于操作,實驗證明對于血漿中的雷尼替丁有很好的添加回收率。同時通過質譜掃描磷脂的特征離子,如圖2可以看出比較蛋白直接沉淀方法和反相SPE方法,磷脂特征離子的響應值有一至兩個數量級的減小。
圖2 一級質譜掃描圖m/z=496 特征離子比較
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