| 實驗方法原理 | 將組織切碎并浸洗，組織塊接種于培養瓶或皮氏培養皿的表面，加入少量含高濃度血清（40 %~50 % ) 的培養基，表面張力使標本保持原位，直到它們自發地貼附于表面，隨后細胞開始生長。 |
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| 試劑、試劑盒 | 生長培養基 皮氏平皿 |
| 儀器、耗材 | 鑷子 手術刀 移液器 離心管 容器 |
| 實驗步驟 | 1. 將組織移入新鮮、無菌 BSS 漂洗。 2. 移人第二個培養皿（25 cm2 培養瓶或 5~6 cm皮氏培養皿（組織培養級別），體積大小及生長培養基的使用量取決于所取組織的量 ，大約 100 mg 組織用 5 個25 cm2 的培養瓶）切除多余組織，如脂肪或壞死組織，再移入第三個培養皿。 3. 用手術刀交叉切成約 1 mm3 的小塊。  4. 用移液管（10~20 ml 寬口吸頭）將組織塊移人 15 或 50 ml 無菌離心管或普通容器內（先用 BSS 或培養基濕潤吸管，否則組織塊易粘在吸管的內壁）。 5. 讓組織塊靜置沉淀。 6. 用 DBSS（10 ml） 重懸沖洗組織塊后靜置，去除上清液，重復此步驟兩次或更多。 7. 將組織塊轉移至培養瓶中（記住先濕潤移液管），每個 25 cm2 培養瓶大約接種 20~30 塊組織。 8. 吸去多余液體，每 25 cm2 生長面加入 1 ml 的培養基（生長培養基（如：DMEM 與 F12 等體積混合，再加 20 % 胎牛血清）），緩緩傾斜培養瓶將組織塊均勻分布于生長面上。 9. 蓋上瓶蓋，放于培養箱或溫室內，37°C 培養 18~24 h。 10. 若組織塊已貼附，則可在未來 3~5 天內將培養基加至每 25 cm2 5 ml，以后每周更換一次，直到細胞已穩定生長。  11. 一旦向外生長已形成，可用鑷子將外植物取出，用預先浸濕的移液管再轉移至新的培養器皿中（而后回到步驟 7 再接種）。  12. 更換第一瓶的培養基直至細胞生長超過生長面積的一半，這時細胞可以傳代了。 |