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  • 發布時間:2020-09-14 22:09 原文鏈接: 原代細胞的脂類染色方法蘇丹紅Ⅲ染色法

    原理:
    蘇丹紅染料在脂類物質中的溶解度大于其在溶劑中的溶解度,如果染料與含有脂類的試樣接觸,便有大量染料進入脂類物質的結構內,使這些結構呈紅色。多用蘇丹紅染料、油紅O、尼羅藍等溶于脂類的染料染色,使脂質呈色。也可用四氧化鋨染色,脂肪酸或膽堿可使四氧化鋨還原為二氧化鋨而呈黑色。

    配制試劑:
    1.蘇丹紅Ⅲ染色液:將1g蘇丹紅Ⅲ溶于加溫的70%乙醇溶液中過濾備用;
    2.甲醛鈣固定液:將10ml甲醛和1g CaCl2混合加水至100ml;
    3.甘油明膠:將12g明膠加入120ml蒸餾水中水浴加熱使其完全溶解,再加入60ml甘油和1g苯酚,充分混勻后即得。于4℃儲存備用;

    染色步驟:
    1.用Hanks液漂洗蓋玻片3次;
    2.用甲醛鈣固定液固定20min;
    3.用蒸餾水漂洗蓋玻片3次;
    4.用70%乙醇將蓋玻片沖洗3次;
    5.用蘇丹紅Ⅲ染色液覆蓋蓋片樣品,染色10—30min;
    6.用70%乙醇漂洗蓋片3次;
    7.用甘油明膠封片后觀察;

    結果:
    原代細胞含脂類的區域呈橘紅色。

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