又一進步！基因療法清除帕金森致病蛋白指日可待

帕金森病是一種慢性進行性運動障礙，影響身體控制運動的能力，目前尚無有效治療方法。近日，由拉什醫學院(Rush Medical College)的研究人員 Jeffrey Kordower博士領導的一個國際小組在帕金森治療中邁出重要一步：利用基因療法清除致病蛋白！

DOI：https://doi.org/10.1038/s41531-018-0062-4

8月22日，《npj Parkinson's Disease》雜志以“Proteasome-targeted nanobodies alleviate pathology and functional decline in an α-synuclein-based Parkinson’s disease model”為題發表了這一研究結果。

帕金森病源于對產生多巴胺的腦細胞的損害。多巴胺是一種化學物質，它將信息傳遞給大腦中控制運動的部分，多巴胺的異常會導致顫抖、僵硬、緩慢運動以及平衡和協調不良。

Kordower團隊在模擬帕金森病的老鼠身上進行了研究，結果顯示，將一種叫做納米體（nanobody）的抗體基因工程片段注入老鼠大腦后，可有效清除蛋白質α-突觸核蛋白的有毒團塊。

帕金森患者黑質區域的顯微照片顯示了路易體和路易神經突起的不同放大倍數。上圖顯示聚集形成路易體的α突觸核蛋白神經內內含物放大了60倍。底部面板是20倍放大的圖像，顯示了各種尺寸的線狀Lewy神經突起和圓形Lewy身體。背景中可見黑質富含神經黑色素的細胞。使用的染色劑:小鼠單克隆α-突觸核蛋白抗體；用邁爾蘇木精復染。來源: Suraj Rajan

從內部固定細胞

α-突觸核蛋白，簡稱α-突觸，自然存在于大腦和身體的其他地方。然而，在神經疾病中，蛋白質簇以錯誤折疊(異常聚集在一起)和紊亂的形式出現。在帕金森氏病中，畸形的α-突觸聚集在被稱為路易體（Lewy bodies）的獨特結構中，這被認為是帕金森病的一個組成部分。

Kordower說:“我們正在尋找降低α-突觸核蛋白水平的方法，以減少由于α-突觸核蛋白在神經系統周圍擴散而導致的積累和毒性。”

他的團隊正在測試的這種方法是將治療性納米體作為基因改變病毒的一部分來入侵細胞。在這項研究中，一旦進入細胞，納米體似乎就終止了因功能失調的α-突觸聚集導致的神經細胞的喪失，進而防止了疾病的發展。

這項研究首次將納米體用于帕金森病。一些先前的研究表明，清除細胞外區域的α-突觸是有希望的，但是Kordower認為細胞內的方法可能更有效，因為細胞內的α- syn數量比細胞外的多。 “如果你降低細胞內水平，那么a-突觸核蛋白很可能不會進入細胞外，因此也就不會擴散。” Kordower解釋道。

使PEST進入細胞內

具體來說，他的團隊在受試大鼠的大腦中創造了α- syn的過量表達。然后，他們在不同大鼠身上測試了兩種類型的基因療法，并在對照組中使用生理鹽水，看看納米體是否能清除這些細胞內的雜物。值得一提的是，這些納米體是北卡羅來納大學矢量核心為這項研究定制的。

結果顯示，其中一種治療方法，VH14 * PEST，效果最好。與對照組相比，它顯著改善了多巴胺水平，減少了運動功能癥狀。

研究人員進一步解釋，VH14 * PEST通過降低α-突觸中被稱為絲氨酸-129的氨基酸水平來實現這些結果，該氨基酸經歷了磷酸化反應。絲氨酸-129是α-突觸的正常成分，但是磷酸化的絲氨酸-129會導致α-突觸的畸形。

Kordower說:“絲氨酸-129磷酸突觸核蛋白的減少證明了納米體在減少大腦病理性α-突觸核蛋白方面的成功。”

該團隊嘗試的第二個納米體，NbSyn87 * PEST，收效甚微并且有副作用，如炎癥增加。PEST是指一系列氨基酸脯氨酸、天冬氨酸、絲氨酸和蘇氨酸，其目標是蛋白酶體——蛋白質的組合，用于分解不需要的或受損的蛋白質。這種PEST序列被發現對紊亂蛋白質的干預有效，例如帕金森氏癥中發現的過量α- syn。

使PEST人性化  

鑒于VH14 *PEST治療顯示出有希望的結果，Kordower和他的團隊計劃開展進一步研究。然而，該小組首先必須將它在大鼠模型中使用的化合物完全“人性化”。也就是說，他們必須確保人們的安全。

Kodower解釋道:“隨后我們必須在老鼠身上重復這些研究，用人性化的版本來確保它和我們一直在測試的一樣有效。適時我們才能考慮在人類臨床試驗中使用這種療法。”

未來，希望這種療法的引入將使人的余生中持續保持腦細胞不含α-突觸核蛋白。