1. 石蠟切片常規脫蠟至水（若用含汞固定液固定的組織，則需用內含 0.5％ 碘的乙醇溶液脫汞 5 min，乙醇濃度為 70％，經自來水洗后以 2.5％ 硫代硫酸鈉浸洗 1 min，水洗）。
2. 0.3％H2O2 甲醇液浸泡切片 30 min，自來水洗，蒸餾水洗，入 PBS（0.01mol/L，pH 7.2）洗。
3. 滴加正常羊血清 1:10，濕盒，室溫，10 min，不洗。
4. 加一抗（抗人κPcAb 與抗人 McAb 的混合液）1:200，濕盒，37℃，45 min 或更長。
5. PBS 洗 5 min×3。
6. 加二抗（GARG+GAMG 混合液 1:200），濕盒，37℃，30 min。
7. PBS 洗 5 min×3。
8. 加酶-抗酶抗體復合物（兔 PAP+鼠 PAP-AP 混合液 1:100）濕盒 37℃，30 min。
9. PBS 洗 5 min×3。
10. 過氧化物酶顯色反應：以 DAB/H2O2 液顯色 7～10 min（鏡下控制顯色程度），PBS 洗 5 min×3。
11. 堿性磷酸酶顯色反應：以萘酚 AS-MX/堅固藍（fast blue）顯色 10～15 min（鏡下控制顯色程度），PBS 洗，自來水洗。
12. 緩沖甘油封片，光鏡下觀察。 展開 | 