哺乳動物細胞真核表達系統為科學研究提供助力

　　哺乳動物細胞真核表達系統是哺乳動物細胞經過翻譯和再加工后產生的外源蛋白，在活性上遠優于原核表達系統和酵母、昆蟲細胞等真核表達系統，更接近天然蛋白。哺乳動物細胞表達系統可以提供較接近自然狀態的重組人蛋白的翻譯后修飾。在蛋白質表達過程中，會形成接近天然蛋白質的蛋白質折疊和聚合，具有活性蛋白質所必需的空間結構和修飾。

　　哺乳動物細胞經過翻譯和再加工后產生的外源蛋白比原核表達系統和真核表達系統如酵母和昆蟲細胞要好得多，更接近天然蛋白。這一特性使得哺乳動物細胞表達系統廣泛應用于重組蛋白藥物，特別是治療性重組單克隆抗體藥物的研發和生產。

　　哺乳動物細胞表達系統的優點是可以指導蛋白質的正確折疊，提供復雜的N-糖基化和準確的O-糖基化等翻譯后加工功能。因此，表達產物在分子結構、理化性質和生物功能上較接近天然高等生物蛋白分子。自裸DNA*直接轉染哺乳動物細胞以來的30年間，哺乳動物細胞表達系統不僅成為多種基因工程藥物的生產平臺，而且在發現新基因和研究蛋白質結構與功能方面發揮了極其重要的作用。

　　根據進入宿主細胞的途徑，表達載體可分為病毒載體和質粒載體。病毒載體是病毒顆粒的形式，通過病毒包膜蛋白與宿主細胞膜的相互作用，外源基因進入細胞。常用的病毒載體有腺病毒、腺相關病毒、逆轉錄病毒等。

　　哺乳動物細胞表達載體的基本要素包括高活性啟動子、轉錄終止序列和有效的基因翻譯信號。需要添加標記基因、復制起點序列和內部核糖體進入位點。

　　幾種常用的表達重組蛋白的細胞系包括CHO細胞、骨髓瘤細胞、COS細胞和293細胞。根據靶蛋白表達的時空差異，表達系統可分為瞬時表達系統、穩定表達系統和誘導表達系統。瞬時表達系統是指導入表達載體后宿主細胞不被選擇性培養，載體DNA隨著細胞分裂逐漸丟失，目的蛋白表達時限短；瞬時表達系統的優點是簡單，實驗周期短。