細胞器的分離主要用到的是離心技術。主要用到:
(一)、差速離心
在密度均一的介質中由低速到高速逐級離心,用于分離不同大小的細胞和細胞器。
在差速離心中細胞器沉降的順序依次為:核、線粒體、溶酶體與過氧化物酶體、內質網與高基體、最后為核蛋白體。
由于各種細胞器在大小和密度上相互重疊,而且某些慢沉降顆粒常常被快沉降顆粒裹到沉淀塊中,一般重復2~3次效果會好一些。
差速離心只用于分離大小懸殊的細胞,更多用于分離細胞器。通過差速離心可將細胞器初步分離,常需進一步通過密度梯離心再行分離純化。
(二)、密度梯度離心
用一定的介質在離心管內形成一連續或不連續的密度梯度,將細胞混懸液或勻漿置于介質的頂部,通過重力或離心力場的作用使細胞分層、分離。這類分離又可分為速度沉降和等密度沉降平衡兩種(圖2-23)。密度梯度離心常用的介質為氯化銫,蔗糖和多聚蔗糖。分離活細胞的介質要求:1)能產生密度梯度,且密度高時,粘度不高;2)PH中性或易調為中性;3)濃度大時滲透壓不大;4)對細胞無毒。
“趕巧了,實際上這兩項工作我們‘磨’了很多年了。”近日接受《中國科學報》采訪時,提及一個月內在《細胞》和《自然》連發論文,中國科學院分子植物科學卓越創新中心研究員張余一語道出科研背后的艱辛。過去十幾年......
國科金發計〔2023〕10號國家自然科學基金委員會現發布細胞器互作網絡及其功能研究重大研究計劃2023年度項目指南,請申請人及依托單位按項目指南中所述的要求和注意事項申請。國家自然科學基金委員會202......
關于發布細胞器互作網絡及其功能研究重大研究計劃2023年度項目指南的通告國家自然科學基金委員會現發布細胞器互作網絡及其功能研究重大研究計劃2023年度項目指南,請申請人及依托單位按項目指南中所述的要求......
2022年8月5日,中國科學院生物物理研究所徐濤課題組,胡俊杰課題組與計算技術研究所肖立團隊在《JournalofCellBiology》雜志上合作發表了題為“DeepContact:Highthro......
近日,我所分子探針與熒光成像研究組(1818組)徐兆超研究員團隊發展了聚集體調控探針,解決了以往蛋白標簽熒光探針在超分辨成像應用中缺乏對多種細胞器通用性標記的問題。該探針基于遺傳編碼技術,實現了細胞內......
國科金發計〔2022〕10號國家自然科學基金委員會現發布細胞器互作網絡及其功能研究重大研究計劃2022年度項目指南,請申請人及依托單位按項目指南中所述的要求和注意事項申請。國家自然科學基金委員會202......
溶酶體對細胞代謝至關重要,并異質地參與各種細胞過程。測量溶酶體代謝異質性的能力對于理解它們的生理作用至關重要。2021年6月14日,中國科學技術大學熊偉與倉春蕾共同通訊在NatureMethods在線......
人工原始細胞有一層蛋白質皮膚(藍色),內涵獨立的液滴(黃色),其功能類似于細胞器。圖片來源:中科院化學研究所喬燕中國科學院化學研究所研究員喬燕、北京化工大學教授林藝揚與合作者人工設計了一款原始細胞,這......
小分子熒光探針憑借其非侵入性、高選擇性和實時原位成像的能力,已經為大量的研究提供了技術支持,并極大地促進了細胞生物學、生物化學等領域的研究。作為一種常見的熒光基團,萘酰亞胺(Naphthalimide......
真核生物細胞器基因組包括線粒體和質體(包括葉綠體、白色體等)的全部DNA分子,是細胞質遺傳的主要載體。在動植物和真菌的單個細胞內,有多個(甚至成千上萬個)細胞器基因組單元的拷貝,使得利用低覆蓋度的全基......