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  • 發布時間:2022-02-21 09:52 原文鏈接: 如何分離各種各樣的細胞器

    細胞器的分離主要用到的是離心技術。主要用到:

    (一)、差速離心
    在密度均一的介質中由低速到高速逐級離心,用于分離不同大小的細胞和細胞器。

    在差速離心中細胞器沉降的順序依次為:核、線粒體、溶酶體與過氧化物酶體、內質網與高基體、最后為核蛋白體。

    由于各種細胞器在大小和密度上相互重疊,而且某些慢沉降顆粒常常被快沉降顆粒裹到沉淀塊中,一般重復2~3次效果會好一些。

    差速離心只用于分離大小懸殊的細胞,更多用于分離細胞器。通過差速離心可將細胞器初步分離,常需進一步通過密度梯離心再行分離純化。

    (二)、密度梯度離心
    用一定的介質在離心管內形成一連續或不連續的密度梯度,將細胞混懸液或勻漿置于介質的頂部,通過重力或離心力場的作用使細胞分層、分離。這類分離又可分為速度沉降和等密度沉降平衡兩種(圖2-23)。密度梯度離心常用的介質為氯化銫,蔗糖和多聚蔗糖。分離活細胞的介質要求:1)能產生密度梯度,且密度高時,粘度不高;2)PH中性或易調為中性;3)濃度大時滲透壓不大;4)對細胞無毒。

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