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  • 發布時間:2020-04-08 20:02 原文鏈接: 實驗小鼠運輸指南(一)

    大家好,我是一只來自邦耀實驗室SPF級動物房的基因編輯小鼠,聽實驗室的哥哥姐姐們說現在外面已經30多度的高溫了,在外面呆幾分鐘就能汗流浹背。雖然我沒有汗腺,但是光想象一下就覺得鼠生艱難啊…不過上完最后一節課就要放暑假,去一個新的環境、參與完成一項偉大的實驗了~但是我們中有的是短途貨車出行,有的是長途跨省出行,據說這其中還有很多學問呢!求知欲強的我決定好好查閱文獻科普一下。

    小鼠作為最重要的模式生物之一,近年來需求量越來愈大,特別是隨著基因編輯技術的發展,使得基因修飾的小鼠成為了科研的必備工具,各個科研單位之間合作交流日益廣泛,使得小鼠運輸需求不斷增多,其中既包括第三方機構定制的模型鼠,科研合作者贈送的動物,甚至不乏來源于國外的實驗動物。然而實驗動物運輸會遇到諸多問題,如運輸后小鼠體重驟減,皮毛粗糙無光澤,食欲下降,甚至出現意外死亡等現象,這都讓我們科研者心疼不已。運輸造成的影響不僅妨礙實驗動物的身心健康、降低其福利水平,且干擾實驗對象的一致性,對獲得的實驗數據造成影響,因此實驗動物的運輸問題值得我們重視起來。

    01 首先,必須重視實驗動物運輸與福利

    關于實驗動物運輸與福利,國際上早有明確的運輸規定,規定內容包括了對動物運輸車輛、運輸物種、生理階段、年齡和性別、運輸時間、食水供應、福利保障等,以及對于動物運輸前準備、運輸過程中的防護以及人員培訓等方面都提出了一些要求和規范:

    1.  如AVMA 要求在動物運輸過程中有專業人員陪同,對于相關人員需提供專業培訓等[1];

    2.  AAALAC指南Guide 中,單獨列出動物運輸章節,對于動物運輸前準備、運輸過程中的防護和福利保障以及人員培訓等方面都提出了一些要求和規范;

    3.   國際獸醫局對于動物運輸中動物的飲水、食物和運輸包裝盒、安全等方面也有明確的規定和指導[2];

    4.   國內在動物運輸方面的法規相對起步晚,但目前已經有很多相關法規對動物運輸設備,工具及飲食等方面作出了要求。

    02 了解小鼠運輸過程的應激反應

    何為應激?即在運輸過程中因為外界因素的刺激導致實驗動物出現不適反應的情況。

    引起因素:如運輸過程中的裝卸、運輸時間、禁食禁水、運輸籠盒、環境溫度等外界條件造成小鼠出現恐懼與疼痛、饑渴、疲勞、通風不良、過度擁擠等,進而引發動物發生的應激反應。

    表現癥狀:動物應激反應會表現為體重下降、攻擊性加強、心跳和呼吸頻率加快、脫水及對疾病的抵抗力降低,嚴重時可影響動物的質量,甚至導致動物在運輸途中衰竭死亡。并且在不同運輸階段會有不同變化:

    ●  運輸初期:在恐懼、疼痛、關禁、擁擠等應激因子的刺激下,表現不安、狂躁和敏感性增高,或畏縮、顫抖和咬包裝盒(箱)等;

    ●  運輸后期:逐漸適應后,動物安靜下來、對環境表現出冷漠,對正常刺激不反應等;

    ●  運輸結束后:動物飲食飲水減少或廢絕、疲乏衰弱、腹瀉或排便減少、脫水,若仔受刺激,甚至導致疾病無法恢復、死亡等。

    舉例:體重下降

    Sunghak Lee等人以676只3-9周的大小鼠為研究對象,在最優的條件下(規定的溫度,裝載密度及運輸環境等)運輸時間約為24h(包括自打包小鼠--拆包裝的時間),小鼠平均體重下降約0.9%,而大鼠會更加敏感,平均體重會下降3.71%。多種小鼠品系之間C57BL/6小鼠變化最為明顯,與ICR小鼠下降0.5%相比,C57BL/6平均下降4.69%。提示近交系小鼠相比封閉群小鼠對于應激更加敏感。文章也提到運輸引起的體重下降是不可避免的,不過一般大小鼠體重下降約5%是沒有太大影響,如果運輸時間長、路途遠、包裝密度大體重消耗可能達到10-15%左右,需要注意。



    大小鼠運輸過程中體重變化[3]

    除了體重,還有一些不易被觀察到的生理變化:

    如研究表明,短途運輸會引起小鼠代謝、神經內分泌系統和免疫系統的功能均發生廣泛而顯著的變化,有文獻報道BALB / c小鼠和ICR 小鼠,經1. 5 h 運輸后,小鼠血糖( GLU) 、外周白細胞總數( WBC) 、血清中皮質酮( CORT) 、白細胞介素2( IL2) 和β-內啡肽( β-EP) 均會明顯降低。不過在72h之內會逐漸恢復。

    小鼠運輸后各個指標的變化[4]

    03 那如何降低應激,保證小鼠運輸福利呢?

    運輸過程中,大小鼠不可避免地會出現應激反應,我們可以從以下幾個方面考慮降低應激反應

    1. 包裝箱要求

    包裝箱選擇上,一般市內短途運輸可以選擇內襯細鐵絲網格的硬紙板箱,如果運輸時間較長需選擇外襯瓦倫紙或鈣塑材料的鐵絲箱盒或塑料箱盒。使用前需仔細檢查鐵絲籠或內襯細鐵絲網是否有凸起倒刺,以防扎傷動物。例如小型嚙齒類有專用運輸箱,確保充分換氣和防止外面微生物污染。

    小鼠專用紙包裝箱和塑料箱

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