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  • 發布時間:2019-04-11 15:34 原文鏈接: 小鼠細胞染色體制備及核型分析實驗2

    GIEMSA 顯帶(G顯帶)

    實驗材料

    分裂中期染色體玻片

    試劑、試劑盒

    2XSSCNaCl胰蛋白酶 Giemsa溶液磷酸鹽緩沖液玻片染色缸

    儀器、耗材

    亮視野顯微鏡

    實驗步驟

    1.于室溫存放染色體玻片 7~10d。

    2.在盛有 60~62°C 的 2XSSC 溶液的廣口瓶中孵育玻片 1.5 h,每個廣口瓶中盛放玻片不超過 7 張。

    3.將玻片轉移至 0.9% NaCl 溶液中(室溫),用新配制的 NaCl 溶液沖洗玻片并晾干。

    4.將玻片在胰蛋白酶/Giemsa 溶液中染色,在將玻片放入廣口瓶中之前,用棉球將染色液表面類似金屬的薄膜去除,或在取出玻片之前用流動水將薄膜沖掉。

    5.將所有玻片移入新配制的磷酸鹽緩沖液中。

    6.將每一張玻片用磷酸鹽緩沖液徹底沖洗 2 次。甩去多余水分,用吹風機吹干玻片。

    7.在亮視野顯微鏡下用 20X 物鏡觀察顯帶的染色體,在玻片上滴加鏡油,在 loox 油鏡下分析染色體。用綠色濾光鏡可獲得比較好的條帶分辨率。用潔凈的丙酮去除鏡油后,保存玻片。


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