在未涉及正文分析介紹及闡述之前,首先給大家分享一個關于斑馬魚研究的框架圖:
從框架圖可以看出,該研究的目的及主要思路是:評估福美鋅(ziram)對斑馬魚發育的影響,主要從形態學、行為、生理學和分子四大方面來進行探討。毋庸置疑,這也是今天將與大家分享的一篇使用Noldus(諾達思)的DanioVision(斑馬魚行為軌跡跟蹤系統)進行斑馬魚研究與分析的文章,發表于2018年9月。研究著重強調以下幾點: 探討了福美鋅(ziram)殺菌劑的毒性對斑馬魚胚胎發育的影響; 測量了線粒體生物能量學、幼魚行為和基因表達; 當福美鋅(ziram)濃度>100nM時,會引起致命性、發育性缺陷和脊索畸形; 暴露于亞致死劑量1nM和10nM 7天之后,幼魚行為開始發生變化。 01 關于福美鋅(ziram) 福美鋅(ziram)是一種廣譜農藥\殺蟲劑,化學上稱之為:二甲基二硫代氨基甲酸鋅 (Houeto et al., 1995; Kanchi et al., 2014),可用作殺蟲劑或殺菌劑。1960年首次在美國注冊,用于控制蘋果和梨子的黑星病、桃子的卷葉病、西紅柿的炭疽病和早疾病 (US EPA, 2004)。 福美鋅(ziram)與環境和人類健康密切相關,這就需要進一步研究其在非靶標生物和人類中的毒性及作用機制。譬如,流行性病學研究表明,單獨使用福美鋅(ziram)或與其它農藥結合起來使用后,與神經退行性疾病相關,如帕金森疾病 (Fitzmaurice
et al., 2014; Rhodes et al., 2013; Wang et al.,
2011)。福美鋅吞食有害、吸入有高毒性、刺激呼吸系統、對眼睛有嚴重傷害,對水生生物有極高的毒性,可能對水體環境產生長期不良影響。 因此,量化ziram這類殺菌劑的負面影響,有利于更好地掌握它們與神經性退行疾病之間的關系,從而更好地對毒理、藥理進行研究。 02 斑馬魚作為模式動物的優勢 斑馬魚是評估神經毒性及神經行為毒性的極佳模式動物,因為它是發展很迅速的脊椎動物,有良好的神經遞質系統 (Panula
et al., 2010),此外,斑馬魚早期生長階段對環境污染和藥物比較敏感(Jin et al., 2009; Schulz et al.,
2010)。 斑馬魚基因與人類基因的相似度達到87%,這意味著在其身上做藥物實驗所得到的結果在多數情況下也適用于人體;再加上其胚胎是透明的,更容易觀察到藥物對其體內器官的影響。 已有研究探討過福美鋅(ziram)對斑馬魚幼魚行為的影響(Lulla et al., 2016)。但研究的具體內容和深度與本研究不同,本研究是從深度、廣度兩方面將福美鋅(ziram)對斑馬魚胚胎發育的影響詮釋的淋漓盡致。 03 主要研究結果 斑馬魚行為軌跡跟蹤系統 (DanioVision) 是一個完整解決方案,由
DanioVision 觀察箱、溫控模塊, 以及預裝于計算機的 EthoVision XT 組成。該系統是用于斑馬魚或其他極小型動物高通量追蹤
的創新系統。借助 Noldus 的動物運動軌跡跟蹤系統可同時在多孔板高精度追蹤多達96只動物。 本研究就是使用了該系統,通過96孔板對斑馬魚在光區、暗區的活動及行為進行觀察和分析,再結合其他分析工具和方法,最終得到研究結果。
表1為在96h之后斑馬魚胚胎中福美鋅(Ziram)的LC50值,從表1數據結果,我們可以看出96h時LC50 為1082.54(相當于0.33 mg/L),表明福美鋅(Ziram)對斑馬魚胚胎具有較高的毒性。
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