底物因素對化學發光法檢測促甲狀腺激素的影響

　　在臨床實驗中，要求所有項目均應該嚴格按照標準化操作程序（SOP）進行操作，但實際工作中由于人為或外界因素，實驗進程往往會受到干擾，對結果造成一定影響。促甲狀腺激素（thyroid stimulating hormone，TSH）是判斷甲狀腺功能是否正常的首選指標，化學發光法因具有快速、準確、靈敏度高等特點而被臨床普遍接受，但在全自動儀器沒有普及的情況下，試劑加注過程通常會有人為因素的存在。底物加注為測量的最后一步，關系到最終的檢測結果，因此，筆者對本院部分甲狀腺疾病患者的血液標本進行了分組研究，現報告如下。
　　1 資料與方法
　　1.1 試劑 北京科美東雅生物技術有限公司生產的化學發光促甲狀腺激素（TSH）定量試劑盒（批準文號，國藥準字S20040080）。兩個level質控由同一廠家提供。
　　1.2 儀器 GloRunner化學發光檢測儀（美國原裝）；DEM-II型自動酶標洗板機；BL-ZDQ-OA微量振蕩器。
　　1.3 檢測 留取25份甲狀腺疾病患者血液，按不同方式分組，同時進行檢測。兩個level質控在控，證明本次試驗TSH檢測結果準確可靠。
　　1.4 統計學處理 由操作軟件自動得出TSH具體數值，組間差異由于數據不符合正態分布，采用秩和檢驗，所有結果均由SPSS 11.5軟件計算所得。
　　2 結果
　　測試階段的底物分別為1 h、30 min和10 min前配置，并各自在加注后5 min、10 min、30 min、1 h和2 h檢測，得出各組促甲狀腺激素的結果。
　　 
　　以底物10 min前配置，加注后10 min檢測為標準組，各分組與其進行秩和檢驗，差異有統計學意義（P<0.05）的部分檢測結果如下：底物配置時間1 h檢測延遲時間1 h（P=0.040）；底物配置時間1 h檢測延遲時間2 h（P=0.000）；底物配置時間30 min檢測延遲時間1 h（P=0.027）；底物配置時間30 min檢測延遲時間2 h（P=0.000）；底物配置時間10 min檢測延遲時間1 h（P=0.000）；底物配置時間10 min檢測延遲時間2 h（P=0.000）。
　　 
　　3 討論
　　TSH是垂體前葉分泌的一種糖蛋白激素，其主要作用是調控甲狀腺細胞生長和甲狀腺激素合成與分泌。甲狀腺功能改變時，TSH的波動較甲狀腺激素更迅速顯著，是反映下丘腦-垂體-甲狀腺軸功能的敏感指標。臨床上多用于甲狀腺功能亢進（甲亢）和減退（甲減）的診斷、原發與繼發性甲減的鑒別診斷、檢測甲亢和甲減的治療效果、亞臨床甲亢的診斷以及垂體TSH瘤的實驗室診斷等。特別是對甲低的診斷，其價值約等于FT4，好于TT4、FT3和TT3。
　　通過對以上數據的比較不難看出，測定促甲狀腺激素時，加注底物后檢測延遲時間對測定結果的影響是顯著的。本實驗中，所有1 h和2 h檢測組，其結果與標準組比較差異均有統計學意義（P<0.05）。其余分組無論底物何時配置（≤1 h）均與標準組較為一致（P>0.05）。因此，筆者認為，在化學發光法檢測促甲狀腺激素的實驗中，無論底物何時配置（≤1 h），都應在底物加注后規定時間內（≤30 min）進行檢測，否則都將會對結果造成影響。
　　筆者所采用的試劑盒，其說明書中關于底物的內容是：“化學發光底物液A、B使用前根據需要量等體積（1∶1）混合，現用現配。”及“必須于加化學發光底物液后的第5~30 min內測量。”說法較為含糊，不利于標準化操作的執行。通過本次試驗，說明筆者在測試中不按操作規程進行，不注重保養及試劑的混勻準備，其結果的偏差顯著，有統計學意義（P<0.05）。
　　化學發光免疫測定敏感度高，甚至超過放射免疫分析。操作上的微小誤差也會導致結果上的偏離[1]。因此，筆者認為應該嚴格按照標準化操作程序（SOP）去做，選擇適當的底物配置時機，盡量避免檢測中系統誤差的出現。