與傳統的HPLC方法相比,UHPLC分析19種PAHs色譜運行時間降低3倍,乙腈的消耗量僅為其1/6。
本文開發了UHPLC和傳統HPLC兩種方法分析了19種PAH,結果表明,與傳統的HPLC方法相比,UHPLC色譜運行時間降低了3倍,乙腈的消耗量僅為其1/6。
多環芳烴(PAHs)是具有致癌作用的稠環芳烴類化合物。作為一種痕量污染物,PAHs廣泛地分布于水體、廢棄物、大氣懸浮顆粒、土壤和食品中。EPA方法550.1、610和 8310中均描述到使用HPLC加上紫外和熒光檢測器能夠進行常規的PAHs檢測。傳統的HPLC方法分析19種PAHs通常需要20min并消耗25ml乙腈。然而,越來越強烈的需求呼喚一個既能提高生產力,又能夠降低溶劑消耗和化學廢物的分析方法。使用基于亞2μm粒徑色譜柱的超高效液相色譜(Ultra High Performance LC,UHPLC),我們發展了一種測定19種PAHs的新方法。該方法與傳統方法相比,樣品通量提高了3倍,同時又大大降低了流動相消耗量。
實驗部分
用于UHPLC分析的Flexar FX-15 UHPLC系統,由帶真空脫氣系統的Flexar FX-15 UHPLC液相泵、Flexar FX UV/VIS UHPLC檢測器(采集頻率設定在100pt/sec)、Flexar 熒光檢測器、Flexar 柱溫箱和Flexar FX UHPLC自動進樣器(PerkinElmer Inc.)組成。UHPLC的系統控制和數據處理由Chromera色譜數據系統(PerkinElmer Inc.)完成。UHPLC實驗中采用了一根1.9μm 50x2.1mm Pinnacle DB PAH 色譜柱(Restek Corp.),0.7ml/min的流速和45℃柱溫。一個從52%乙腈/水到100%乙腈的四分鐘線形梯度用于該分析,該方法的初始系統壓力為11?800psi。一個配備了柱溫箱、UV/VIS和熒光檢測器的200系列HPLC系統用于傳統液相色譜的分析。TotalChrom色譜軟件用于200系統的控制和數據處理。5μm 150x3.2 mm Brownlee Analytical PAH 色譜柱(PerkinElmer Inc.), 1.2ml/min的流速和30℃柱溫用于HPLC分析。一個20min的兩步線梯度即11min的從40%乙腈/水到100%乙腈,隨后保持100%乙腈9min,用于HPLC分析。該方法的初始系統壓力為2500psi。
討論
圖1的結果顯示:UHPLC相對于HPLC樣品通量有了顯著的提高。總分析時間(包括平衡時間)減少至原來的1/4,但即使在樣品通量獲得大幅提升的前提下,UHPLC方法仍獲得了優異的分離度。
另一個重要的因素是減少溶劑的消耗量。本文介紹的UHPLC方法消耗了1/6的乙腈,即降低了83%的溶劑消耗和廢液的產生。當前,全球實驗室都在努力追求更“綠色”、更高效的操作之時,樣品通量的提高和有毒有害廢棄物排放量的減少是UHPLC的最具革命性意義的優勢。
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