人用疫苗佐劑的研究,其最終目的是與疫苗一起應用于人體,進行傳染病的預防。而疫苗佐劑臨床觀察的評價結果決定著該佐劑能否應用于臨床。疫苗佐劑在臨床前和臨床研究中,主要應考慮以下幾個方面 [4] 。
1.佐劑對疫苗免疫原性的影響
首先,必須證明佐劑確實能夠有效誘發機體產生長期、高效的特異性免疫反應,提高機體保護能力,這是佐劑應用的基礎。如果研究結果顯示加入佐劑對免疫原性的增強效果甚微,則不應加入,以避免佐劑帶來的其他副反應。免疫效果應包括體液免疫和細胞免疫兩個方面。體液免疫除檢測功能性抗體(中和、調理吞噬或殺菌抗體)外,還應檢測免疫球蛋白的亞類。細胞免疫應檢測抗原特異性T細胞反應,包括Th1、Th2和T細胞調節因子和（或）有關的細胞因子等。
2.佐劑的毒理學及藥理學
佐劑的毒理學方面,主要考慮接種部位的病理反應、機體產生的抗體反應、抗體持續時間等。目前我國批準用于疫苗的佐劑為氫氧化鋁,而鋁佐劑通常使疫苗產生抗體的時間滯后,且增加注射局部的副反應發生率。如疫苗的抗原量能滿足免疫的需要,則建議不加佐劑。佐劑的藥理學試驗主要應考慮發生作用的原理、作用結果與劑量的關系、免疫程序和接種途徑與效果的關系等。
3.佐劑與疫苗中各成分的相互作用
佐劑作為疫苗成分中的一部分,應該與其他成分相容,如佐劑與防腐劑、佐劑與非活性成分等。并應考慮佐劑對不同成分吸附作用的影響,吸附后是否有解離及解離程度、各組分的添加順序對吸附產生的影響等。
4.佐劑單獨給藥時人體內的代謝
新疫苗佐劑,包括已上市的佐劑,改變用量或給藥途徑,需要充分的臨床前安全性數據的支持。同時考慮佐劑可能會在體內蓄積,還應進行佐劑單獨給藥時的人體藥代動力學研究。人體藥代動力學研究的設計應依據臨床前研究資料,根據佐劑的性質和特點進行,以獲得科學的、令人信服的結果。
5.佐劑的劑量
佐劑的使用劑量以及佐劑與抗原的比例,關系到是否能夠誘導出所需的免疫應答反應和盡量減少不良反應。對于新佐劑和已上市的抗原結合物的劑量范圍,應參照已上市同類產品的用量。對于新佐劑和新抗原的結合物,既要研究佐劑的用量,也要注意選擇佐劑與新抗原的最佳比例。應盡可能在疫苗的目標人群中進行研究,并設計多個劑量組。
6.免疫增強效果
臨床觀察應遵循GCP原則,設計時不僅應隨機、雙盲、設置對照,而且還應結合抗原和佐劑的特性。應在目標人群中進行觀察,如果年齡組的跨度較大,在設計中應事先進行分層或進行一個以上的臨床觀察。對于大多數臨床觀察,尤其是如果已獲得上市許可的疫苗抗原量發生了變化,則需要重點評價與保護有關的有效性免疫指標。如果沒有,就要對其免疫保護效果進行評價。對于新佐劑新抗原疫苗,還要采用預防同樣疾病的上市疫苗作為對照。如果沒有,也可采用目標人群可用的、其他不相關的疫苗作為安慰劑對照。必要時,還應設立多組對照。樣本量應滿足統計學要求。對非劣效試驗,必須事先設定非劣效的界值,并提供設定的依據。在設計臨床觀察使用的分析方法和樣本量大小時,還應適當考慮多因素影響的問題。
7.局部和全身反應
研究表明,絕對安全的佐劑是不存在的。人們只能根據佐劑的作用機制進行調整,盡可能做到免疫刺激作用最大化,而毒副作用最低化。臨床觀察設計時,要充分考慮佐劑、佐劑與疫苗使用引起的不良反應的收集。如果是新佐劑與已上市抗原的臨床研究,應有與已上市疫苗(佐劑和抗原)不良反應的比較、分析。如果是新佐劑與新抗原,則應按照國家有關要求,系統而詳細地收集不良反應,包括局部和全身反應、有關系統的實驗室檢測指標和儀器檢查結果等。