氨基酸的薄層層析實驗原理

　　聚酰胺薄膜層析是60年代以后發展起來的一種新的層析方法，特別適用于氨基酸及其衍生物的分析。具有靈敏度高、分辨率強、操作方便快捷等特點。

　　聚酰胺是一類化學纖維素原料，即錦綸（尼龍）。由乙二酸和乙二胺聚合而成的，稱錦綸66。

　　由于分子中含有大量的酰胺基團，故稱聚酰胺。聚酰胺薄膜是在滌綸片基上涂上一層錦綸制成的。聚酰胺對許多極性物質有吸附作用，這是由于聚酰胺的-C=O和-NH -能與被分離物質的一定基團形成H鍵。如酚類（黃酮類、鞣質）和酸類（氨基酸、核苷酸）能以其羥基與酰胺鍵的羰基形成H鍵。在層析過程中，當樣品隨流動相通過聚酰胺薄膜時，由于聚酰胺與各極性分子產生H鍵吸附能力的強弱不同，從而可將樣品中各成分分離。

　　物質分離后，層析點在圖譜上的位置，即在濾紙上的移動速率，用Rf來表示。

　　在一定條件下，每個物質都有特定的Rf值，因此，用Rf可鑒定不同的物質。

　　無色物質的層析圖譜可用光譜法（紫外照射）或顯色法鑒定。氨基酸層析圖譜常用茚三酮作顯色劑。本實驗利用單向上行層析法鑒定氨基酸。