測序技術在缺失型脊髓性肌萎縮癥基因診斷中的應用

　　近期，天津市兒童醫院兒科研究所研究人員發表論文，旨在探索將測序技術應用于缺失型脊髓性肌萎縮癥（SMA）基因診斷的可行性。研究指出，測序技術在缺失型SMA患者的基因診斷上優于經典PCR-RFLP法，更方便快捷，結果更明確，建議替代常用的PCR-RFLP法。該文發表在2014年第07期《天津醫藥》雜志上。

　　設計2對引物，PCR擴增SMA致病基因運動神經元生存基因（SMN1）與其同源基因SMN2之間5個不同堿基所在區域，第1對引物正向擴增SMN1內含子6至7間長度為501 bp片段，包含4個不同堿基位點g.31957、32006、32154及32269；第2對引物反向擴增SMN1外顯子8區域，長度為189 bp，包含1個不同堿基位點g.32734。根據測序圖譜區分SMA患者與攜帶者和（或）正常人。將此方法應用于7個臨床疑似SMA家系的診斷，并與聚合酶鏈反應-限制性片段長度多態性分析（PCR-RFLP）法進行比較。

　　6例測序圖譜顯示SMN內含子6至外顯子8之間5個SMN1和SMN2差異位點g.31957、32006、32154、32269及32734均只有SMN2特有堿基a、T、g、g和A，患兒父母（攜帶者）相同位點顯示為a/g、T/C、g/a、g/a和A/G。說明患者缺失SMN1基因，缺失范圍包括內含子6至外顯子8；攜帶者則既有SMN1基因，又有SMN2基因，與患者能區分開。1例檢測結果為a、T、g、g和A/G，說明其缺失范圍不含外顯子8。測序法與PCR-RFLP方法結果一致。