液體活檢——癌癥早期診斷新希望

　　研究人員表示，一項不斷進步的技術使他們對液體活檢--一種抑制腫瘤擴散的方法，重新燃起了興趣。

　　該技術，即基因測序，讓研究人員可以更仔細地觀察到隨著癌癥發展腫瘤留下的遺傳線索。隨著這些新的“液體”血液檢測工作被應用至臨床當中，這項技術也許可以進一步揭示為抵抗治療腫瘤分子面具發生變化的機制。并且它還可能有助于識別早期病理變化。

　　這些檢測是在血液中搜尋DNA片段和腫瘤在生長過程中脫落的其他遺傳物質。其中有的實驗是檢測完整的循環腫瘤細胞；另一些只檢測循環DNA；還有的實驗是為了尋找遺傳碎片，包括DNA、RNA和代謝產物。

　　將來哪種方法能夠最好地指導癌癥治療尚未確定。市場對于液體活檢的商業興趣增加了，這是研究者所面臨的未知因素之一。總部位于印度的RNCOS咨詢公司估計，液體活檢市場將在2020年跨過10億美元大關。而且至少有30家公司在爭奪這一市場。

　　Richard Schilsky是一名醫學博士，同時也是美國臨床腫瘤協會（ASCO）的高級副總裁和首席醫療官，他表示，這些測試最重要的意義在于長期監測腫瘤，因為腫瘤基因變異很快而且不易檢出，容易產生耐藥性。“沒有人建議將這些測試用于早期篩查或作為一個診斷測試。我們還沒有打算這樣運用。”他說。

　　Schilsky和其他人認為，液體活檢可能對初期患者有效，這是一種進行組織活檢的可能的方法，也是醫生用來得到腫瘤的遺傳信息以及制定如何最佳的治療方案的一種途徑。但活檢可能是痛苦的，成本高，而且根據腫瘤的位置或病人的健康狀況不同，還不一定可以實施活檢。因此，如果通過一個簡單的血液測試就可以追蹤，甚至可能是診斷早期癌癥，那么這種非侵入性和更便宜的方法顯然非常具有吸引力。“我們需要知道的是，液體活檢發現的一個突變是否代表腫瘤負荷，以及是否可以根據某一個突變進行治療。”

　　產前關聯

　　大約在兩年前，液體活檢在癌癥領域得到落實，盡管這并不是一項新技術。無細胞DNA技術，是指對血液中循環DNA進行測量，該技術已被應用于胎兒畸形的產前檢查。這些測試從母親的血液中分離得到胎兒的血液，結果意外地發現了幾種母體癌癥。這一發現導致了液體活檢進入到如今更大的癌癥市場。

　　許多投資于液體活檢技術的企業都是行業巨頭，如Johnson and Johnson公司， Illumina公司，Qiagen公司，Foundation Medicine以及羅氏。羅氏六月獲美國食品和藥物管理局批準進行第一個治療晚期非小細胞肺癌患者的液體活檢測試。該測試在10%~20%的肺癌患者的細胞表面上發現了一種突變。很多患者對靶向藥物厄洛替尼（Tarceva）有響應，從而減緩了癌癥細胞的快速分裂。

　　位于雷德伍德的守護者健康公司最近完成了一項液體活檢法研究，檢測了血液中70個與癌癥相關的突變。今年六月在芝加哥舉行的ASCO年會上公布了這項迄今為止規模最大的研究成果。

　　在加利福尼亞大學擔任分子藥理學主任的Philip Mack博士和綜合癌癥中心的Davis說，“我們要做的是確定這些突變中哪些是可以治療的，否則對于臨床治療沒有任何作用。”

　　守護者健康公司的顧問Mack展示了一份研究結果。總體而言，通過對包含50種腫瘤類型的15000例患者進行血液測試，發現由血液測試確定的基因組模式與那些記錄在腫瘤分析研究文獻中的模式高度匹配。

　　此外，在將近400例患者中，將血液系統中的循環DNA和之前分離于同一個癌癥患者的組織樣本之間進行了直接比較。在血液中檢測到的某個突變同時在腫瘤中被發現的概率是94%~100%。研究人員表示，該分析還發現了一些與抵抗治療相關的突變，但原始的組織活檢忽視了這一點。

　　然而百分之十五的患者沒有檢測到腫瘤DNA。

　　“你總是會錯過一些東西，但是15%已經很好了，”Mack說。他表示，大多數人擔心的是假陽性問題，特別是在早期疾病當中，腫瘤脫落的DNA比他們快速增長的DNA數量少的多。

　　研究的障礙

　　在這一點上，使用活檢作為一種診斷工具也有一些局限性。比如，研究人員還不清楚哪個腫瘤流入血液中的DNA最多。也不確定一些腫瘤脫落的DNA能否被檢測到。

　　國家癌癥研究所的癌癥生物標志物研究組負責人Sudhir Srivastava博士說：“這是一個很有趣的問題。”對于成年人來說，收集常規血液檢查的體積一般為4mL。“要檢測血液中的一個單一的DNA突變，則需要5至10毫升的血液，”這說明了盡管在過去的十年中基因測序得到快速發展，未來我們仍然面臨技術挑戰，。

　　Srivastava呼吁更多的研究應該集中在比較組織樣本和液體活檢方面。

　　他說：“我們需要知道，液體活檢發現的一個突變是否代表腫瘤負荷。而且由于腫瘤具有多樣性，如果發現一個突變，我們能否根據這個突變進行治療呢？”

　　Srivastava認為，就目前而言，這些血液測試最有可能應用于治療監測、預測復發和追蹤抗性方面。

　　但問題仍然存在。敏感性需要提高。“如果我們想要通過這些測試來找出與耐藥相關的早期突變，除非我們能給患者提供一種隔絕所有有害副作用的療法，”ASCO Schilsky說。

　　展望未來

　　根據Mack的說法，調查人員將同時跟進早期守護者公司發布的數據以尋找導致癌癥發生的額外突變。針對晚期癌癥患者的多中心臨床試驗也正在計劃中，不僅可以驗證這些新的分子發現，也可以阻止癌細胞抗性的發展。

　　在三種以血液為基礎來捕捉癌癥信息的方法當中，Mack說他覺得檢測循環腫瘤DNA是最佳的方式，而且周期最短。

　　他也承認即使是利用這種方法，對看似健康的人進行常規血液檢測也不一定能夠立即發現癌癥。

　　“早期腫瘤很難被發現，”Mack說，“即使利用這項技術，癌前腫瘤也有可能根本檢測不出來。”

　　將幾種方法結合起來是否能夠更有效，這一點仍然有待觀察。亞特蘭大美國癌癥協會的副首席醫療官Leonard Lichtenfeld說，起碼現在有一家英國公司正在探索這種可能性，他們相信多種技術并行對研究腫瘤DNA含量更有幫助。然而，如果成功的話，這樣的測試必須足夠完善，消除人們對于檢測出“可能不會變成癌癥但在體內潛伏多年的一些突變”的擔憂。他說：“我們的需要是確定我們可以檢測到的信息當中哪些具有真正的臨床意義。”

　　Schilsky換了種說法：“如果你有一個可以對突變作出各種解釋的試驗，這意味著什么？臨床醫學領域必須辨別出它的真正價值。”