液相色譜使用篇—“治未病”

導 言

中醫自古以來就有“上醫治未病”的說法，即采取相應的措施，防止疾病的發生發展。而儀器故障的最佳解決方案就是預防故障的發生。

在儀器使用過程中注意某些細節可以極大地降低儀器的故障率，使實驗平穩進行。今天就來說說LC使用過程中的一些注意事項。

流動相選擇

使用不符合要求的流動相或者未進行過濾時，可能會導致系統污染和管路堵塞。需要使用HPLC或以上級別的有機溶劑，水需要使用純化水或二次蒸餾水。流動相需要使用0.45μm孔徑或更小孔徑的濾膜過濾，特別是使用緩沖鹽時必須過濾。濾膜有各種不同的材質，千萬不能選錯。

水相的流動相容易長菌，一般使用1-3天就需要更換。

流動相更換

可以互溶的流動相可以直接更換。不可互溶的流動相，需要選擇一種可與兩者互溶的中間流動相進行過渡，再更換為新的流動相。

更換含鹽流動相和有機相時需要用水過渡，以防止鹽結晶析出，進而堵塞管路或者磨損單向閥、柱塞桿密封圈、高壓閥等部位。

LPGE系統排氣

LPGE 系統中各個流路使用同一個泵頭，當流動相中既有純有機相又有含鹽流動相時，兩者連續排氣，可能有鹽結晶析出。中間需要用純水（或者水和低比例有機相的混合溶液）過渡。如果流動相中的鹽含量不高時，也可以使用先排有機相再排含鹽流動相的順序進行排氣。

水相流路沖洗

如果某個流路固定使用水相，即使每天更換新的流動相，也會有細菌在管壁上生長。為了防止大量菌膜附著在管路內壁上，還需要定期使用有機相濃度在50%以上的流動相進行沖洗除菌。

柱塞桿清洗

從上圖的泵頭結構可以看出，瓶子里的清洗液是用來清洗和潤滑柱塞桿，主要為了延長密封圈的壽命。

如無柱塞清洗液，在使用含鹽流動相時，柱塞桿會暴露在空氣中，附著在柱塞桿上的緩沖鹽會隨溶劑揮發而析出，對密封圈產生磨損，柱塞清洗液的作用是將附著在柱塞桿上的緩沖鹽清洗下來，延長密封圈的使用壽命。

柱塞桿清洗一般有兩種方式，手動清洗或自動清洗，清洗液用10%異丙醇水溶液。

對于手動清洗，一般在實驗完成后用注射器緩慢注入清洗液10-20mL（如果鹽濃度較高需要1-2小時清洗一次）。注意：儀器在運行過程中，也是可以手動打清洗液的。

對于自動清洗裝置，建議每周更換一次清洗液，如果是超高效液相或者流動相的鹽濃度較高，則需提高更換頻率。

色譜柱保存

實驗結束后，色譜柱需要按照柱子說明書的要求進行清洗保存，否則會縮短色譜柱的使用時間。以C18柱為例：要先用10%甲醇水溶液沖色譜柱30min，再用純甲醇（或者90%甲醇）沖洗20min。如果較長時間不用還要把色譜柱拆下，封堵兩端后存放。

流路系統保存

當儀器停止使用時，如果水相的流動相長期保存在流路中，細菌就會在管道中肆意生長。需要及時更換為有機相或者有機相濃度在50%以上的流動相（四元低壓比例閥建議保存在50%甲醇水溶液中）。

儀器除塵

儀器長期使用后由于實驗室環境等因素會使儀器中積聚很多灰塵，容易引起靜電，在一定濕度下甚至會導電。如不及時清理，電路板損壞的風險會急劇上升。

實驗室環境與儀器的正常運行是緊密相關的，保持實驗室環境清潔能夠讓儀器更加平穩運行，讓實驗分析更加順利。

如果發現儀器有很多灰塵，可以用吹風機對儀器內部進行除塵。如操作有困難請聯系島津工程師，我們有維護保養業務可以保您儀器清潔如新，保養完成還會提供三個月基礎保修。

資深液相工程師余曉維