色譜柱在色譜儀分析系統中起著分離作用,是色譜分析的核心部件。正確使用和維護色譜柱尤為重要,使用不當就會降低柱效、縮短使用壽命甚至損壞。以下從幾個方面簡答介紹液相色譜柱在使用過程中應當著重注意的問題。
一、避免壓力和溫度的急劇變化
溫度的突然變化或者使色譜柱從高處掉下都會影響柱內的填充狀況;柱壓的突然升高或降低也會沖動柱內填料,因此在調節流速時應該緩慢進行,以保持色譜柱內填料的穩定性。
二、避免直接改變溶劑的組成
在需要改變檢測樣品溶液組成是,應逐漸改變溶劑的組成,特別是反相色譜中,不應直接從有機溶劑改變為全部是水,反之亦然。且在使用次洗脫能力強的 洗脫液沖洗色譜柱時,對流路系統中流動相的置換應以相混溶的溶劑逐漸過渡,每種流動相的體積應是柱體積的20倍左右,即常規分析需要50~75ml。
三、避免色譜柱反沖
一般來說色譜柱不能反沖,只有色譜柱使用說明書上標明該柱可反沖才可以反沖除去留在柱頭上的雜質。否則,反沖色譜柱的影響是迅速降低柱效。
四、避免流動相使用不當而破壞固定相
選擇使用適宜的流動相(尤其是pH),以避免固定相被破壞。有時可以在進樣器前面連接一段預柱,分析柱是鍵合硅膠時,預柱為硅膠,可使流動相在進入分析柱之前預先被硅膠"飽和",避免分析柱中的硅膠基質被溶解。
五、禁止樣品未經處理直接進入色譜柱
避免將基質復雜的樣品尤其是生物樣品直接注入柱內,需要對樣品進行預處理或者在進樣器和色譜柱之間連接一保護柱。保護柱一般是填有相似固定相的短柱。保護柱可以而且應該經常更換。
六、禁止將緩沖溶液長時間存放在色譜柱內
保存色譜柱時應將柱內充滿乙腈或甲醇,柱接頭要擰緊,防止溶劑揮發干燥。禁止將緩沖溶液留在柱內靜置過夜或更長時間。
七、禁止色譜柱未經處理直接封存
色譜柱使用完成之后須使用相宜溶劑進行清潔處理,例如ODS柱宜用甲醇沖洗至基線平衡;當采用鹽緩沖溶液作流動相時,使用完后應用無鹽流動相沖洗;含鹵族 元素(氟、氯、溴)的化合物可能會腐蝕不銹鋼管道,不宜長期與之接觸;裝在液相色譜儀上的色譜柱如不經常使用,應每隔4-5天開機沖洗15分鐘。
色譜柱是液相色譜儀的最核心部件,價格相對昂貴,如避免強烈的碰撞和震動,不要讓柱床變干,避免在嚴寒環境受凍等。之前,我們先了解一下液相色譜柱的基本結構,色譜柱由接頭、螺帽、柱管、填料、墊圈及過濾片等組成......
分析測試百科網訊2021年9月27日,第十九屆北京分析測試學術報告會暨展覽會(BCEIA2021)在北京?中國國際展覽中心開幕。在本屆展會上,上海通微分析技術有限公司(以下簡稱“通微”)攜EasySe......
高效液相色譜柱的系統由儲液器、泵、進樣器、色譜柱、檢測器、記錄儀等幾部分組成。儲液器中的流動相被高壓泵打入系統,樣品溶液經進樣器進入流動相,被流動相載入色譜柱(固定相)內,由于樣品溶液中的各組分在兩相......
液相色譜柱是液相色譜工作的關鍵,液相色譜柱的性能直接關系到分離分析的準確性與適用性。色譜柱按用途可分為分析型和制備型兩類①常規分析柱(常量柱),內徑2~5mm,柱長10~30cm;②窄徑柱(narro......
第一、安捷倫的色譜柱有很多種,所以要分清類型去沖洗。第二、作為普通C18柱,尤其是硅膠基質的普通C18柱,對酸堿鹽以及水,都是造成柱子的損壞的流動相構成。水不能過多(除了帶AQ的純水柱,一般各家品牌都......
1、色譜柱中的流動相是否會排干不少做色譜分離試驗的人遇到過這樣的情形:不慎未及時補充流動相,泵將溶劑瓶中的流動相吸干了,HPLC系統由此而停止工作了。如此情況是否會損壞色譜柱?泵是否已將色譜柱中所有流......
當今分析化學的領域,色譜分析占據了半壁江山,尤其是在藥物分析方面更是如此。例如《中國藥典》2005年版二部收載的藥物已有近43.1%的藥品質量標準不同程度的采用了高效液相色譜分析方法。尤其是復方制劑、......
1目的:色譜柱的使用和保養:液相色譜儀由高壓液體泵、檢測器及液相色譜柱等三部分組成,其中液相色譜柱的正確安裝和使用,是液相色譜工作的關鍵;也是液相色譜工作者獲得正確可靠的實驗數據的必經之路。建立高效液......
分析型到制備型一套完整的填料體系,目前可提供的填料鍵合相有C18、C4、C8、SI、NH2、CN、Phenyl、Diol以及手性填料TBB和DMB。孔徑有60A、100A和300A三種,滿足不同條件的......
色譜柱按用途可分為分析型和制備型兩類①常規分析柱(常量柱),內徑2~5mm,柱長10~30cm;②窄徑柱(narrowbore),內徑1~2mm,柱長10~20cm;③毛細管柱(又稱微柱microco......