液相色譜檢測器保養維護

液相色譜檢測器保養維護。

1.檢測器性質概述

檢測器是液相色譜系統的“眼睛”，測量離開柱的樣品的濃度或質量。光電檢測器測量柱流出物的光吸收、熒光和折光率的變化。電化學和電導檢測器溶液的變化。特殊的樣品用特殊的檢測器。不合適的檢測器測得的結果也不可靠。

2.常出現的UV檢測器故障

故障類型 故障率（%）

噪音 26

漂移 12

靈敏度 9

燈壽命 24

氣泡 7 在檢測生物樣品時可能為主要故障

池污染 6

其他 8

無故障 11

3.具體故障與解決

a.燈故障主要是燈失靈或能量衰減以及燈引起基線噪音。

除EC外，檢測器中燈是重要部件。燈失靈，明顯地引起檢測器信號總下降。多數檢測器有觀察孔或指示器，由此可看見燈工作的情形。但是不可以直接觀察紫外燈，因為紫外線會損傷眼睛。

基線噪音這是燈失靈更普遍的故障。氘燈打開后有30分鐘的zui大噪音，所以每次使用前至少預熱30分鐘。

換燈時要注意不能在燈上留下指痕。因為未擦去的指痕在開燈后會引起燈表面永久性的損害。請用軟布或專用擦鏡紙握住燈，在開燈之前用棉簽蘸取甲醇擦去。新裝上后至少要點燃1小時以上，才能開始定量分析。

b.池故障與解決

氣泡是zui常見故障。瞬間而過的氣泡會在色譜圖上出現長噪音尖峰。若感覺到有氣泡，當將等調整670nm左右，戴上防護眼鏡便可以看到池內有一個圓環，并不是清晰地綠色圖像。流動相脫氣不足會產生氣泡，池污染會使得故障加重。用充分脫氣的流動相可以帶走氣泡，或用強溶劑通過系統。在正相和反向系統轉換的時候一定要過渡。

檢測器阻塞有下列現象：系統壓力升高，松開檢測器進口的接頭壓力降至正常水平。檢測器部分易發生的地方為進口管道或熱交換器、池本身和出口管道。用一般的凈化的溶劑去掉阻塞可能不奏效但可以試試。若是廠家標明耐高壓，可用泵打溶劑反沖，常可以去掉堵塞。壓力不要超過6MPa.正常的池不可用此法，一般情況請咨詢廠家的維護工程師較好。

c.池阻塞和污染

如確定是池堵塞，可用注射器回抽溶劑或用泵反沖（耐高壓），一般能疏通。通常此故障較少發生，而污染是經常發生的。池污染一般是色譜圖的噪音增大，靈敏度降低甚至不出峰，也提高了氣泡的故障率。清洗池前向拆去柱和排空管道，準備好防護用品，如眼睛、圍裙、橡膠手套等。池進出口都接上細管徑的聚乙烯管。進口管上接10ml的注射器，出口管沒入異丙醇中。清洗程序如下：回抽10ml異丙醇通過池去掉流動相殘留。 回抽10ml蒸餾水 回抽10ml6mol/L硝酸，通過池去掉沉積物，此步應小心，要備有防止酸溢出的應急措施 回抽20ml蒸餾水 至少用100mlHPLC級別的水正向通過池。

d.池滲漏

可能發生在接頭、池窗的密封墊上，也可能發生在樣品池或參比池的一側，或者是石英窗破裂。除了接頭松動，池滲漏也可能是管道阻塞、流速較高、池后的阻力大，使池的橫截面承受過高的壓力，嚴重地引起池破裂。也可能組裝不當、墊圈不密封造成的滲漏等。沒有多大把握zui好請廠家來維護。

e.測量和參比池配合不當

正常情況下UV檢測器用空氣做參比，電路設計也無流動相本地。用有紫外吸收的流動相通過UV檢測器，或是用示差折光檢測器都要在參比池內注滿流動相。如參比池中流動相不與測量池中的流動相一樣，本底輸出信號不為零，進樣時有可能出偽峰或倒峰。從濕參比池換成空氣參比池時，要清洗干凈后用干燥的氮氣吹干，不能留下溶劑殘留，否則就出“氣泡樣”的故障。

f.波長方面的問題主要是次級發射效應、選擇波長不正確、波長的裝置差、波長校正問題、低波長測量問題和單色器等問題。

次級發射效應在可見光范圍內，使用氘燈做光源可提高靈敏度，但是帶來了次級發射效應。單色器能發射比設定值高一級的發射光，正好是設定值的一半。如設定值在405nm，次級發射光正好是202.5nm，三級發射光低于干擾波長之下，由于大氣中的氧所吸收。次級發射光正好在紫外光范圍內，即是檢測器在兩種波長下檢測，違反了比爾定律，結果是非線性的。我們可以用鎢燈在紫外范圍內無次級發射，但是靈敏度下降。用氘燈在高于360nm測定，應考慮有次級發射的可能。在熒光檢測器中，也有這個問題存在。

選擇波長不正確可影響實驗結果的精確性，如有可能應選擇在干擾組分的吸收光譜平穩的范圍或組分的zui高吸收處。在所選波長太靠近流動相的吸收范圍，梯度洗脫時會增加基線漂移。

波長的裝置差，可變波長UV檢測器所采用的機械轉動光柵選擇波長。旋轉和光柵間的傳動裝置由齒輪和桿組成，用久了會機械磨損，所選的波長并不真正是您選擇的波長。

波長校正問題我們可以用鉻酸鉀在275nm校正吸收波長等方法來處理。

低波長測量問題是我們在采用低波長時，樣品和流動相的變化比在高波長下更靈敏。我們要選擇應選擇低波長吸收較小的溶劑，通常是乙腈好于甲醇。

單色器問題主要是光柵和鏡子蒙上一層污染物，一般這種情況請廠家維護較好。

g.時間常數是相應時間的設定

起著過濾噪音的作用。有些有固定的時間常數，有些需要自己設定。如果太小可能增加短噪音，時間常數太大可能出寬峰、峰拖尾和短峰。可用自己的經驗估算時間常數，即選zui窄的有關峰寬的10%作為時間常數。

h.泵噪音主要引起檢測器折射率的變化與流動相的組成、壓力以及溫度由引起的噪音。一般情況要加阻尼器，特別是RI檢測器對波動十分敏感。。

I.溫度的影響

主要是環境溫度變化常引起基線漂移，一般情況請使用柱溫箱等設施或環境溫度波動的控制。

j.混合問題

主要是流動相不完全混合可出現周期性的基線變化，在示差折光檢測器非常嚴重，如果改用手動混合相對較好。特別是比例懸殊太大時zui明顯。

k.線性問題

主要因為檢測器或方法上的問題，非線性響應是可能的。如仔細稀釋樣品、選擇波長，良好的方法可以延長線性范圍。檢查線性要在一定的濃度范圍內，用不同濃度的標準品證實線性的相關性；用幾乎澄清的溶劑做流動相可擴展線性范圍，用強紫外吸收的流動相檢測器線性范圍幾乎不到零，建議用無吸收的流動相或在流動相無吸收的波長下檢測。

l.信號線故障

主要是記錄器和數據系統連接檢測器的信號線引起的。要注意正負是否接對或線路松動、接觸不良。另外就是有良好的接地裝置。

m.內部自檢沒有通過