用三嗪染料配基吐溫80磷酸鹽液固萃取2體系分離純化乳酸脫氫酶

摘　要　目的　利用三嗪類染料Cibacron B lue F3G2A 修飾的吐溫80, 與磷酸鉀鹽構建染料配基吐溫802鹽液2固親和萃取體系, 從豬心肌勻漿液中分離純化乳酸脫氫酶。方法　成相染料配基吐溫80 濃度為15% (其中吐溫80 中含染料配基吐溫80 為10% ) ; 成相磷酸鉀鹽濃度為1. 49 mo l?L (pH 8. 50) ; 勻漿液加入量為體系的1% , 一次成相正萃取。將吐溫80 相保溫溶解, 改變磷酸鉀鹽濃度為0. 91mo l?L , 二次成相反萃取。結果　一次成相正萃取吐溫80 相平均酶活收得率97% , 純化8. 0 倍。二次成相反萃取, 鹽水相酶活收得率近100% , 實現了酶與吐溫80 相的分離。結論　三嗪染料配基吐溫802磷酸鹽液2固萃取體系, 分離純化乳酸脫氫酶, 具有良好選擇性和分離純化效果。對其進一步研究與開發, 具有較大實際應用價值。