紫外分光光度法測定啤酒中的雙乙酰

1原理

 雙乙酰作為揮發性組份從啤酒樣中蒸發出來，與鄰苯二胺反應，生成2，3－二甲喹喔啉，在335nm波長下進行測定。由于其他聯二酮類都具有相同的反應特性，再加上蒸餾過程中部分前驅體要轉化成聯二酮，因此上述測定結果為總聯二酮含量(以雙乙酰表示)。

2 儀器

帶有加熱套管的雙乙酰蒸餾器 ；

具有錐形瓶(或平底蒸餾燒瓶)的蒸汽發生瓶：2000mL(或3000mL) ；

容量瓶：25 mL ；

美析UV-1100或UV-1200紫外分光光度計：備有10mm石英比色皿或20mm玻璃比色皿。

3 試劑和溶液

4mol/L鹽酸溶液：按GB/T 601配制；

l0g/L鄰苯二胺溶液：稱取鄰苯二胺0.100g，溶于4mol/L鹽酸溶液中，并定容至10mL，搖勻，放于暗處。此溶液須當天配制與使用；若配制出來的溶液呈紅色，應重新更換新試劑；

有機硅消泡劑(或甘油聚醚) 。

4 分析步驟

4.1  蒸餾

    將雙乙酰蒸餾器安裝好，加熱蒸汽發生瓶，使水至沸。通汽預熱后，置25mL容量瓶于冷凝器出口接受餾出液，外加冰浴冷卻，加2～4滴消泡劑于100mL量筒中，再注入未經除氣的預先冷至5℃左右的酒樣100mL，迅速移入已預熱的蒸餾器內，并用少量水沖洗帶塞漏斗，蓋塞。然后用水封口，進行蒸餾，直至餾出液接近25mL(蒸餾需在3～5min內完成)時取下容量瓶，達到室溫用水定容，搖勻。

4.2  顯色與測量：

分別吸取餾出液10.0mL于兩支干燥的比色管中，并于第一支管中加入鄰苯二胺溶液0.50mL，第二支管中不加(做空白)，充分搖勻后，同時置于暗處放置20～30min，然后于第一支管中加4mol/L鹽酸溶液2mL，于第二支管中加入4mol/L鹽酸溶液2.5mL，混勻后，于335nm波長下，用20mm玻璃比色皿，以空白調儀器零點，測定其吸光度。比色測定操作須在20min內完成。

5分析結果的表述

    試樣中雙乙酰含量按式(2)計算：

X ＝A₃₃₅*1.2……………………………………………………………

式中：   X —— 試樣中雙乙酰的含量，mg/L ；

    A₃₃₅—— 試樣在335nm波長下，用20mm比色皿測得的吸光度；

     1.2—— 吸光度與雙乙酰含量的換算系數。