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  • 發布時間:2019-03-31 20:42 原文鏈接: 組織的分離實驗_離心分離法

    實驗方法原理如培養物為血液、羊水、腹水和胸水等細胞懸液時,可采用離心法分離。一般用低速500~1000 轉/分速度,離心5~10 分鐘即可。如懸液量大,離心時間可適當延長,但如離心速度過大和時間太長,易壓擠細胞使之受損或死亡。微量全血法淋巴細胞培養時,可不必進行淋巴細胞分離,可采用全血培養法。在需用大量白細胞進行培養情況下,才應采用特殊分離技術如使用分層液等方法。
    實驗材料

    抗凝血

    試劑、試劑盒

    BSS

    儀器、耗材

    離心機

    實驗步驟

    國產淋巴細胞分層液(Lyphocyte Separation Medium)效果很好。分層液是根據細胞比重不同,使各類細胞相互分開的。紅細胞比重1.092,淋巴細胞和大單核等白細胞比重為1.070;分層液適用于分離血中淋巴細胞。


    1.  取抗凝血若干毫升;


    2.  按1:1 加入無菌分層液(濾過除菌)后,800—1000 轉離心;


    3.  無菌分離出白細胞(白細胞位于紅細胞上層,呈微白色);


    4.  BSS 漂洗1—2 次,可用于培養或其它實驗。

    展開 
    注意事項

    1.  如用動物皿(如小鼠),白細胞的比重與人不同;小鼠白細胞比重為1.080左右,需用相應比重的分層液。


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