組織的分離實驗_離心分離法
實驗方法原理如培養物為血液、羊水、腹水和胸水等細胞懸液時，可采用離心法分離。一般用低速500~1000 轉/分速度，離心5~10 分鐘即可。如懸液量大，離心時間可適當延長，但如離心速度過大和時間太長，易壓擠細胞使之受損或死亡。微量全血法淋巴細胞培養時，可不必進行淋巴細胞分離，可采用全血培養法。在需用大量白細胞進行培養情況下，才應采用特殊分離技術如使用分層液等方法。實驗材料抗凝血試劑、試劑盒BSS儀器、耗材離心機實驗步驟國產淋巴細胞分層液（Lyphocyte Separation Medium）效果很好。分層液是根據細胞比重不同，使各類細胞相互分開的。紅細胞比重1.092，淋巴細胞和大單核等白細胞比重為1.070；分層液適用于分離血中淋巴細胞。1. 取抗凝血若干毫升；2. 按1：1 加入無菌分層液（濾過除菌）后，800—1000 轉離心；3. 無菌分離出白細胞（白細胞位于紅細胞上層，呈微白色）；......閱讀全文
組織的分離實驗_離心分離法
實驗方法原理如培養物為血液、羊水、腹水和胸水等細胞懸液時，可采用離心法分離。一般用低速500~1000 轉/分速度，離心5~10 分鐘即可。如懸液量大，離心時間可適當延長，但如離心速度過大和時間太長，易壓擠細胞使之受損或死亡。微量全血法淋巴細胞培養時，可不必進行淋巴細胞分離，可采用全血培養法。在需用
組織的分離實驗
試劑、試劑盒 Hanks儀器、耗材 鑷子網篩碟皿吸管注射器培養瓶實驗步驟 一、切割分離法在進行組織塊培養時，可采用剪切法，一般多剪切成1 mm3大小的塊。具體操作如下：1. ?無菌切取1 cm3組織一塊，置入青霉素瓶或小燒杯中，左手斜持容器，右手持眼科尖剪或彎剪（剪柄較長為好）伸入容器中，反復剪切組
組織的分離實驗
機械分散法 胰蛋白酶消化消化分離法 膠原酶消化分離法 離心分離法 EDTA 消化分離法 ? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒
超速離心法純化病毒實驗——界面離心分離法
實驗方法原理離心管內病毒懸液中的病毒和細胞碎片隨其自身密度的大小而下沉或上浮到相等密度梯層中實驗材料待純化的病毒試劑、試劑盒蔗糖溶液儀器、耗材離心機實驗步驟(1) 取濃縮后的病毒懸液 5 ml, 加入 1/5 或 1. 66/5 體積的 600 g/L 的蔗糖溶液，使其含蔗糖10%~15%, 搖勻。
血清脂蛋白的快速離心分離法
血清脂蛋白的快速離心分離法??????????????????????????????????????????????????????????? YU.2003.7利用不同容量的角式轉頭及很容易配制的梯度液，在各種型號的超速離心機上都能得到滿意的分離結果。下面舉了幾個分離實例，實際上還可以應用于各種
血清脂蛋白的快速離心分離法
利用不同容量的角式轉頭及很容易配制的梯度液，在各種型號的超速離心機上都能得到滿意的分離結果。下面舉了幾個分離實例，實際上還可以應用于各種型號各種容量的固定角式轉頭。（一）?? 梯度液A液：11.40gNacl，0.1g EDTA-Na2，置于1000ml量筒中加入500ml重蒸水及1ml 1N Na
從豌豆組織分離葉綠體實驗_葉綠體分離
實驗材料葉子組織試劑、試劑盒PBF-Percoll 溶液山梨醇BSAHEPES-KOHEDTA儀器、耗材聚碳酸酯離心管實驗步驟1. 制備 Percoll 梯度(1) 兩個 50 ml 的聚碳酸酯離心管中分別加入 25 ml 50% 的 PBF-Percoll 溶液。50% PBF-Percoll0.
組織的分離實驗_機械分散法
試劑、試劑盒Hanks儀器、耗材鑷子網篩碟皿吸管注射器培養瓶實驗步驟一、切割分離法在進行組織塊培養時，可采用剪切法，一般多剪切成1 mm3大小的塊。具體操作如下：1. ?無菌切取1 cm3組織一塊，置入青霉素瓶或小燒杯中，左手斜持容器，右手持眼科尖剪或彎剪（剪柄較長為好）伸入容器中，反復剪切組織至1
組織的分離實驗_EDTA－消化分離法
實驗方法原理EDTA是一種非酶性消化物，常用不含Ca2+和Mg2+的BSS 配成0.02%的工作液。關于EDTA的作用機制一般認為是：一些組織，尤其是上皮組織，在生存中需要Ca2+和Mg2+才能維持組織的完整性。EDTA能從這些組織生存環境中吸收這些離子，形成螯合物，能促進細胞相互分離。EDTA 作
從豌豆組織分離葉綠體實驗
葉綠體分離 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 葉子組織 試劑、試劑盒
從豌豆組織分離葉綠體實驗
葉綠體分離實驗材料葉子組織 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?試劑、試劑盒PBF-Percoll 溶液 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?
超離心分離法的基本信息介紹
超離心分離法通常指用超速離心機分離高分子的方法。含有高分子的溶液(如核酸和蛋白質的溶液)受到強大的離心力作用時，如果這些高分子物質的密度大于溶液的密度就會沉降下來達到分離的目的。其沉降的速度既與其分子的大小和密度有關，也與溶液的分子密度和粘度及其分子的形狀有關。超速離心法也可用來測定高分子的分子
線粒體分離實驗—從組織中分離線粒體
實驗材料肝臟試劑、試劑盒MS儀器、耗材勻漿器實驗步驟1. 取出肝臟，注意不要弄破膽囊。放進一置于冰上的燒杯中，剪去任何結締組織。稱其質量后放回燒杯中。用鋒利的剪刀、手術刀或剃須刀片將之切成 1~2 mmol/L 的薄片，用勻漿緩沖液（1x MS) 沖洗兩次以去除大部分的血。轉移至勻漿器中。加入足夠的
最常用的超離心分離法的方法介紹
最常用的有： ①沉降速度法：用超離心法，增加蛋白質溶液的離心強度，當溶液所含蛋白質顆粒大小和形狀都相同時，這些顆粒以相同的速度移向管底，并形成清楚的界面；當溶液中有多種大小不同的蛋白質顆粒時，就會有幾個界面，用特殊的光學系統可以觀察到沉降界面，從而判斷出蛋白質的沉降速率。當沉降界面以恒速移動時
組織的分離實驗_膠原酶消化分離法
實驗方法原理膠原酶是一種由細菌中提取出的酶，對膠原有很強的消化作用，適于消化纖維性組織、上皮組織以及癌組織等。上皮細胞本身對膠原酶有一定耐性，但膠原酶對細胞間質有好的消化作用，可使上皮細胞與膠原成分脫離而不受傷害，效果甚好。此酶在鈣和鎂離子存在情況下仍有活性，故可用BSS和含有血清的培養液配制。實驗
中間絲的分離方法實驗——從組織中分離中間絲
實驗材料牛舌試劑、試劑盒解聚緩沖液組裝緩沖液勻漿緩沖液抽提緩沖液柱緩沖液PEM 緩沖液儀器、耗材離心機實驗步驟一、從牛舌上皮分離角蛋白中間絲1. 從當地屠宰場拿到新鮮牛舌。一條舌頭通常可以產出幾十毫克純化了的角蛋白中間絲。2. 用刀片切刮，把舌中的肌肉和黏膜分開。舌黏膜片（大約 1cmx1 cm )
分離核仁實驗—從人肝臟或胎盤組織中分離核仁
實驗材料組織試劑、試劑盒NKM儀器、耗材粗孔濾紙Teflon-玻璃勻漿器實驗步驟1. 準備溶液：NKM：0.13 mol/L NaCl，5 mmol/L KCl，8 mmol/L 乙酸鎂2.2 mol/L 蔗糖，10 mmol/L MgCl20.88 mol/L 蔗糖0.34 mol/L 蔗糖，含
線粒體分離實驗—從組織培養細胞中分離線粒體
實驗材料細胞試劑、試劑盒RSBMS 緩沖液儀器、耗材Dounce 勻漿器實驗步驟1. 用 11 ml 冰上預冷過的 RSB 重新懸浮細胞，轉移到一個 15 ml 的 Dounce 勻漿器中RSB（使組織培養細胞膨脹的低滲緩沖液）10 mmol/L NaCl2.5 mol/L MgCl210 mmol
牙髓組織的分離
試劑和材料：1.?無鎂和鈣的PBS平衡鹽溶液（PBSA）；2.?MSC培養基：含2mmol/L 谷氨酰胺的α-MEM，添加15%胎牛血清，0.1mmol/L左旋抗壞血酸磷酸鹽，100U/ml青霉素和100μg/ml鏈霉素；3.?培養皿；4.?精細鑷（小號和大號）；5.?牙科碳化鉆頭；6.?牙挖器；7
組織的分離實驗_胰蛋白酶消化消化分離法
實驗方法原理胰蛋白酶適于消化細胞間質較小的軟組織，如胚胎組織、羊膜、上皮組織、肝、腎等軟組織，對傳代細胞也非常好。用于消化纖維性組織或較硬的癌組織則較差。Ca2+和Mg2+對胰蛋白酶的活性有一定抑制作用，故需用不含這些離子的BSS 配制。血清有抑制胰蛋白酶活性的作用，因此在做細胞傳代時，用胰蛋白酶消
離心機常見的離心機離心分離法都有那幾種？
常見的離心機離心分離法都有那幾種？ ①差速離心法 差速離心法主要是采取逐漸提高離心速度的方法分離樣品中不同密度的結構，如線粒體、葉綠體、蛋白質等！ 第一步:設置起始的離心速度較低，先讓較大的顆粒沉降到管底，小的顆粒仍然懸浮在上清液中。 第二步:收集沉淀，改用較高的離心速度離心懸浮液，將較小的
從組織分離粗制質膜組分的另一實驗方法
從組織分離粗制質膜組分的另一實驗方法 ? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 勻漿緩沖液
從組織分離粗制質膜組分的另一實驗方法
Neville(1968) 所述的方法對分離鼠肝質膜的效果較好，但對分離其他組織的質膜不一定適用。這里，介紹一種從其他組織制備粗制質膜組分的方法。本實驗來源于蛋白質純化與鑒定實驗指南，作者：朱厚礎。試劑、試劑盒勻漿緩沖液儀器、耗材Dounce 氏玻璃勻漿器（15-ml)帶 A 杵實驗步驟設備Doun
新鮮組織分離原代細胞
新鮮手術取得或凍存的組織于37 ℃ 快速復溫，原代細胞培養工作液清洗3次，盡量修剪去除纖維組織，將組織塊剪成約1 mm3大小的小塊，彎頭吸管吸取組織塊均勻種植于75 cm2 培養瓶瓶底，瓶內加入少量原代細胞培養工作液，小心翻轉培養瓶使組織塊黏附于瓶底，置于37 ℃、5% CO2培養箱中培養6-8
牙髓干細胞的分離培養——牙隨組織的分離
實驗材料牙試劑、試劑盒滅菌無Ca2+和Mg2+的PBS(PBSA)MSC培養基消毒液（如聚維酮碘）儀器、耗材非滅菌使用高速牙科鉆時的裝備（如空氣壓縮機）培養皿精細鑷（小號和大號）牙科碳化鉆頭牙挖器高速牙科鉆實驗步驟(a)用PBSA洗三遍，充分清潔牙齒表面。(b)用消毒液消毒，然后再用PBSA充分清洗
瀝青混合料離心抽提儀離心機,離心分離法使用方法
適用范圍主要適用于離心分離法測定粘稠石油瀝青拌制的瀝青混合料中瀝青含量（或油石比），以評定路面施工時商品瀝青的質量，也適用于舊路調查時檢測瀝青及瀝青混合料的瀝青用量。儀器符合交通行業（公路瀝青混合料及瀝青混合料試驗規程）（JTJ052-93）中瀝青混合料中瀝青含量試驗（離心分離法）（T0722-93
純化DNA實驗_從哺乳動物細胞或組織分離DNA
基因純化，可以用于（1）對大量提取的質粒DNA進行純化；（2）常用的方法有柱層析法和氯化銫梯度離心法。實驗材料細胞試劑、試劑盒TBS抽提緩沖液儀器、耗材離心管實驗步驟1. 根據樣品類型，從下列方法中選一個作為步驟 1 進行操作。(1) 細胞樣品① 單層培養的細胞以用冰預冷的 TBS 將單層細胞洗滌
分離核仁實驗——分離核仁
實驗材料肝臟試劑、試劑盒NKM儀器、耗材粗孔濾紙Teflon-玻璃勻漿器實驗步驟1. 制備溶液：NKM：0.13 mol/L NaCl，5 mmol/L KCl，8 mmol/L MgCl20.34 mol/L 蔗糖，3 mmol/L MgCl22.3 mol/L 蔗糖，10 mmol/L MgCl
mRNA－的分離實驗
實驗方法原理?哺乳動物細胞的絕大部分mRNA在其3‘ 端均有一poly（A）尾，因此可以用oligo（dT）-纖維素親和層析法從大量的細胞RNA中分離mRNA。實驗步驟1.? 用0.1?mol/L NaOH懸浮0.5～1.0 goligo（dT）-纖維素。?2. ?將懸浮液裝入滅菌的一次性層
mRNA－的分離實驗
oligo（dT）-纖維素親和層析法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 ?哺乳動物細胞的絕大部分mRNA在其3‘ 端均有一poly（A）尾，因此可以