細胞凍存
1.預先配制凍存液:10 % DMSO + 90%胎牛血清,4℃冰箱保存預冷;
2.用胰酶對細胞進行消化:倒去培養瓶中的培養基或用槍小心吸去培養板中的培養基,PBS沖洗兩次,用胰酶消化細胞(盡可能溫和);
3.再次用完全培養液懸浮細胞,將預冷的凍存液加入消化完全的細胞中,用滴管輕輕吹打混勻.
4.在每支凍存管中加入1ml細胞液,密封后標記凍存細胞名稱和凍存日期.
5.凍存步驟的細致直接關系到細胞復蘇時的活力,如果有程序降溫器(放在-80℃冰箱過夜,放入液氮罐)最好;或者可以在4℃,2h;然后轉到-20℃,2h;-80℃,2h;放入液氮罐.