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  • 發布時間:2021-12-17 14:31 原文鏈接: 細胞消化過度會對流式凋亡實驗有影響嗎

    因為是誘導凋亡的實驗,細胞加藥處理后,貼壁細胞會因為活力喪失而脫壁漂浮,而這部分細胞正是你需要的,所以加藥處理完后要收集全部培養上清,少量PBS洗瓶內剩下的細胞,洗的PBS與之前收集的上清合并。胰酶消化。消化完畢用之前收集的培養基中止消化。離心后PBS再洗一遍。離心,棄上清,細胞沉淀中加入70% 4度預冷的乙醇(PBS配制),4度放置不少于1小時(有的文獻說是不少于15分鐘)。之后離心去乙醇,PBS洗一遍后加入PI和DNAse,終濃度50 ug/ml,混勻,避光室溫放置30 min后即可上流式細胞儀測定。

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