WIKI資訊
因為是誘導凋亡的實驗，細胞加藥處理后，貼壁細胞會因為活力喪失而脫壁漂浮，而這部分細胞正是你需要的，所以加藥處理完后要收集全部培養上清，少量PBS洗瓶內剩下的細胞，洗的PBS與之前收集的上清合并。胰酶消化。消化完畢用之前收集的培養基中止消化。離心后PBS再洗一遍。離心，棄上清，細胞沉淀中加入70% 4度預冷的乙醇（PBS配制），4度放置不少于1小時（有的文獻說是不少于15分鐘）。之后離心去乙醇，PBS洗一遍后加入PI和DNAse，終濃度50 ug/ml，混勻，避光室溫放置30 min后即可上流式細胞儀測定。......閱讀全文
無論是原代細胞還是細胞系或癌細胞，細胞長滿瓶后，需要對細胞進行傳代或將細胞收集起來用作其他實驗。貼壁生長的細胞必須要做的一步便是消化過程，下面便對細胞消化、中和、洗滌等過程做個簡單介紹。1、絕大部分細胞消化的時候是只需用胰酶潤洗一遍即可，吸去胰酶后，殘留胰酶附著在細胞表面在37度一般不到2min足夠
細胞培養實驗中不可或缺的除了培養基，胰酶也是非常重要的一個角色，雖然細胞培養試驗基本技術大同小異，每種細胞的培養條件各不相同，但是，在細胞傳代過程中都少不了這個步驟—胰酶消化。細胞消化使用胰酶時需要了解哪些問題？一、 細胞培養過程中為什么要使用胰酶呢？胰酶的作用是什么？胰酶是一種蛋白酶，酶切位點是肽
實驗方法原理用胰蛋白酶消化細胞，用于貼壁細胞傳代培養。實驗材料細胞試劑、試劑盒胰蛋白酶酒精PBS儀器、耗材超凈工作臺酒精燈酒精棉球培養箱顯微鏡吸管離心管離心機實驗步驟一、傳代前準備?1. ?預熱培養用液：把已經配制好的裝有培養液、PBS液和胰蛋白酶的瓶子放入37℃水浴鍋內預熱。?2. ?用75%酒精
一、酶消化法1、胰酶。這是用得多的。一般濃度在0.25-0.5%。作用時間根據細胞種類、作用溫度等因素而變化很大，從幾分鐘到幾十分鐘不等。0.25%的胰酶作用于單層貼壁的細胞，在37度條件下，一般消化1-5分鐘就足夠了。終止是用血清。主要作用于細胞間。配制時不能用含鈣、鎂的平衡液，否則影響活性。保存
適用于，無師兄、師姐、非細心、單獨開展細胞培養的實驗者對一般細胞 0.25% 胰酶(胰蛋白酶，Trypsin)配方：100ml PBS,0.25g胰酶步驟：1先配100mlPBS(1000mlPBS:8.0gNaCl,3.4785gPO4HNa2·12H2O/2.9gPO4HNa2 ,0.2gKCl
一、酶消化法1、胰酶。這是用得最多的。一般濃度在0.25-0.5%。作用時間根據細胞種類、作用溫度等因素而變化很大，從幾分鐘到幾十分鐘不等。0.25% 的胰酶作用于單層貼壁的細胞，在37度條件下，一般消化1-5分鐘就足夠了。終止是用血清。主要作用于細胞間。配制時不能用含鈣、鎂的平衡液，否則影響活
每個做細胞實驗的人，不管去哪“浪”，心里都會有個牽掛：我的細胞過兩天要傳代！大部分組織細胞離體培養時，會以貼壁的形式生長（除了取自血、脾或骨髓的細胞）;完全培養基中的血清，含有許多帶陽性電荷的促細胞附著因子（層黏連蛋白?Laminine、纖維鏈接蛋白 Fibronectin 等胞外基質），能幫助細胞
細胞消化小技巧不一定要一次把所有細胞都要消化下來！晃動培養盤并在顯微鏡下用肉眼觀察，只要70~80%細胞都收縮了或超過適合消化時間，就該終止消化反應，如果細胞量夠即可進行后續傳代或實驗步驟；如果細胞量不夠，則可視情況用不含鈣、鎂離子的平衡鹽溶液清洗仍貼壁的細胞，再進行一次消化反應。▲ 消化不下來的細
細胞的生命極其脆弱 消化一定程度上是對它們的一種折磨 所以做好細胞消化 善待你的細胞們 一些細節要注意 在使用胰酶（Trypsins）細胞消化液的過程中要特別注意避免消化液被細菌污染。 胰酶細胞消化液消化細胞時間不宜過長，否則細胞鋪板后生長狀況會較差，做流式時的CD Marker 也可
細胞消化成團個人認為是和消化酶有關，消化酶是否保存不當（主要為溫度）并且時間過長失去了消化活性（可以做酶活測定），或者酶的濃度配的不合適，在允許范圍（防止消化過度損傷細胞）內適當加大酶液量。以上是某f發表的一些淺見解。關于第二個有大量細胞脫落，我想是沒有做好及時的細胞傳代，細胞匯合80%（理想）就應