結締組織染色實驗——膠原蛋白、彈力蛋白和黏蛋白染色

黏蛋白是多糖與蛋白質結合的復合物，組織內含有硫酸根等成分，帶有酸性物質，可稱為酸性黏液（黏蛋白）。彈力纖維中的彈性蛋白由一種凝膠狀的肽鏈組成，通過非極性吸附顯色。膠原纖維是由纖維母細胞產生的一種膠原蛋白鉸鏈而成，易與酸性染料結合。經過組合染色后，可分別顯示膠原蛋白、彈力蛋白和黏蛋白成分。

阿爾辛藍染色液：阿爾辛藍（Alcian blue 8 GS，由上海試劑三廠生產）1 g，冰醋酸 3 ml，蒸餾水 97 ml。

間苯二酚-復紅染色液：間苯二酚 2 g，堿性復紅 2 g，蒸餾水 400 ml，30％ 三氯化鐵 3 ml，鹽酸 2 ml。先將間苯二酚、復紅和蒸餾水混合攪拌均勻，煮沸后加入三氯化鐵，再煮沸攪拌 3～5 min，冷卻后過濾。將濾紙上的沉淀物一起放在隔水式恒溫箱中烤干，取出放入燒杯中，并加入 95％ 乙醇 200 mU 放在水浴鍋內加熱攪拌溶解，取出濾紙，盛于棕色試劑瓶內，再補 20 ml 的 95％ 乙醇，最后加入鹽酸 4 ml，混合使用，室溫下保存。

1. 石蠟組織切片，常規脫蠟至水。

2. 95％ 乙醇浸洗 2 次，浸入間苯二酚-復紅染色液內 1 h 左右。

3. 直接用 95％ 乙醇快速分化 2 次，浸入蒸餾水內 1 min。

4. 阿爾辛藍染色液染色 15 min，蒸餾水洗 2 次。

5. 用 3％ 乙酸液浸泡 1 min，蒸餾水洗 2 次。

6. 滴染麗春紅-苦味酸染色液 3 min。

7. 無水乙醇脫水、二甲苯透明和中性樹膠封固。

1. 間苯二酚-復紅染色液裝入試劑瓶中，將瓶口塞緊，放在冰箱內保存。

2. 麗春紅-苦味酸染色后，迅速脫水、過濾紙吸干，透明和封固。

結果：黏蛋白呈綠色，彈力蛋白呈紫色，膠原蛋白呈紅色，背景呈淡黃色。