結締組織染色實驗——膠原蛋白、彈力蛋白和黏蛋白染色
實驗方法原理黏蛋白是多糖與蛋白質結合的復合物，組織內含有硫酸根等成分，帶有酸性物質，可稱為酸性黏液（黏蛋白）。彈力纖維中的彈性蛋白由一種凝膠狀的肽鏈組成，通過非極性吸附顯色。膠原纖維是由纖維母細胞產生的一種膠原蛋白鉸鏈而成，易與酸性染料結合。經過組合染色后，可分別顯示膠原蛋白、彈力蛋白和黏蛋白成分。實驗步驟阿爾辛藍染色液：阿爾辛藍（Alcian blue 8 GS，由上海試劑三廠生產）1 g，冰醋酸 3 ml，蒸餾水 97 ml。間苯二酚-復紅染色液：間苯二酚 2 g，堿性復紅 2 g，蒸餾水 400 ml，30％ 三氯化鐵 3 ml，鹽酸 2 ml。先將間苯二酚、復紅和蒸餾水混合攪拌均勻，煮沸后加入三氯化鐵，再煮沸攪拌 3～5 min，冷卻后過濾。將濾紙上的沉淀物一起放在隔水式恒溫箱中烤干，取出放入燒杯中，并加入 95％ 乙醇 200 mU 放在水浴鍋內加熱攪拌溶解，取出濾紙，盛于棕色試劑瓶內，再補 20 ml 的 95％ 乙......閱讀全文
結締組織染色實驗——膠原蛋白、彈力蛋白和黏蛋白染色
實驗方法原理黏蛋白是多糖與蛋白質結合的復合物，組織內含有硫酸根等成分，帶有酸性物質，可稱為酸性黏液（黏蛋白）。彈力纖維中的彈性蛋白由一種凝膠狀的肽鏈組成，通過非極性吸附顯色。膠原纖維是由纖維母細胞產生的一種膠原蛋白鉸鏈而成，易與酸性染料結合。經過組合染色后，可分別顯示膠原蛋白、彈力蛋白和黏蛋白成分。
結締組織染色實驗——彈力纖維與膠原纖維染色
實驗方法原理彈力纖維由隨機交聯盤繞的一些肽鏈組成，含有豐富的二硫鍵糖蛋白成分，所以可稱為彈性蛋白。易與染色液中堿基結合，為了能夠更好地顯示彈力纖維和膠原纖維成分，選用維多利亞藍、麗春紅和苦味酸組合雙重染色方法。實驗材料石蠟組織切片試劑、試劑盒維多利亞藍糊精間苯二酚蒸餾水乙醇三氯化鐵水溶液濃鹽酸苯酚二
結締組織染色實驗——膠原纖維染色
結締組織廣泛分布于入體和動物體內，而疏松結締組織在組織損傷后的修復過程中，纖維細胞可轉化為活躍的成纖維細胞。成纖維細胞能形成膠原纖維、彈力纖維和網狀纖維以及基質等成分。致密結締組織的間質內含有大量纖維，排列緊密，細胞和基質比較少，主要含有彈性纖維，又稱為彈性致密結締組織。網狀結締組織由網狀細胞和網狀
膠原纖維的膠原蛋白的染色
膠原纖維在HE染色法被染成粉紅色，除此之外，它還可以用一些陰離子的染料來進行染色，如用淡綠可把它們染為綠色，用甲苯胺藍可將其染為藍色，在網狀纖維染色中，如不加以處理，它又可被染為棕黃色。常用的特殊染色法有Van Gieson.Masson和Mallary等方法。在免疫細胞化學染色中，膠原纖維由于含的
結締組織染色實驗——網狀纖維與膠原纖維染色
實驗方法原理網狀纖維是網狀結締組織中的一種纖維，由交錯排列的纖細的纖維組成。由于網狀纖維由含有糖蛋白的膠原蛋白組成，這種組織蛋白質易與氨性銀結合，再選用酸性染料染色液，能夠顯示網狀纖維與膠原纖維的二種組織結構成分。常用 Gomori 銀與麗春紅-苦味酸復合染色法。實驗材料石蠟組織切片試劑、試劑盒二甲
蛋白質染色實驗
考馬斯亮藍染色 銀染法 非氨鹽銀染法 快速銀染法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 1. 凝膠中蛋白質的定位可用考馬斯亮藍染料染色或銀染色。前者簡便
蛋白質染色實驗
實驗材料 蛋白質試劑、試劑盒 聚丙烯酰胺凝膠固定液染色液脫色液儀器、耗材 濾紙培養箱實驗步驟 1. ?將聚丙烯酰胺凝膠放在塑料容器并以3~5倍體積的固定液覆蓋，在旋轉搖床中緩慢揺動2 h。?2. ?傾去固定液，以考馬斯亮藍染色液覆蓋凝膠，并緩慢搖動4 h。3. ?傾去染色液，用約50 ml 固定液沖
蛋白質染色實驗——考馬斯亮藍染色
蛋白質染色可用于（1）蛋白質的觀測（2）蛋白質含量的測定。實驗方法原理1. 凝膠中蛋白質的定位可用考馬斯亮藍染料染色或銀染色。前者簡便且快捷，而銀染法具有相當高的靈敏度，能用于檢出更少量的蛋白質。2. 蛋白質的存在影響酸堿滴定中所用某些指示劑的顏色變化，從而改變這些染料的光吸收。在些基礎上發展了蛋白
脂蛋白染色介紹
1．油紅O（oil red）染色將凝膠先置于平皿中，用5%乙酸固定20min，用H2O漂洗吹干后，再用油紅O應用液染色18h，在乙醇∶水=5∶3中浸洗5min，最后用蒸餾水洗去底色。必要時可用氨基黑復染，以證明是脂蛋白區帶。2．蘇丹黑B（sudan black B）將2g蘇丹黑B加60ml吡啶和40
蛋白質染色
二維凝膠電泳(2-DE)是廣為蛋白質組學科學家們應用的經典技術之一，蛋白混合物在兩個維度上被分離。第一步是常規的等電聚焦，此過程中蛋白質根據其等電點被分離。接著，第二維使用SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)，將蛋白質按分子量進一步分離。上述兩步操作在互相垂直的兩個方向上，使分離的蛋白
蛋白質分離和分析——凝膠蛋白質染色
實驗步驟?基 本 方 案 1 考馬斯亮藍染色檢測范圍為〇.3?lMg 每蛋白質條帶。材 料（帶 V 項 目 見 附 錄 1)聚丙烯酰胺凝膠（單 元 12. 3)考馬斯亮藍、銀染用固定液考馬斯亮藍染液甲醇/乙酸脫色液7 % (V /V ) 水乙酸Whatman 3M M 濾 紙（可選）干 膠 儀（可選
明膠、膠原蛋白和水解膠原蛋白的不同之處
明膠、膠原蛋白和水解膠原蛋白并不相同。明膠是膠原在高溫作用下的變性產物，其組成復雜，相對分子質量分布寬，由于高溫造成膠原蛋白變性，膠原分子的3股螺旋結構被破壞，但可能有部分α鏈的螺旋鏈還存在，因此一定濃度的明膠溶液能成凝膠狀。在食品工業、攝影和制藥業中被廣泛應用。據報道，全世界每年生產的明膠產品
結締組織染色實驗
實驗方法原理 膠原纖維是由膠原蛋白聚合與纏繞嫘旋排列而成的，具有雙折光性，經過特殊染色后，能夠在偏光顯微鏡下觀察到四種不同型的膠原纖維。由于膠原纖維分子中含有堿性氨基酸，能夠與酸性染料進行結合反應。常用麗春紅-苦味酸（2，4，6-三硝基苯酚）染色法。實驗材料 石蠟組織切片試劑、試劑盒 麗春紅 S 水
一例手掌孤立性膠原瘤病例分析
1 臨床資料 患者男， 17 歲。右手掌腫物 17 年。患者于出生時右手掌 出現膚色腫物，且逐漸增大，無明顯自覺癥狀。予皮炎平外搽， 效果不明顯，且皮疹逐漸增大。曾到多家醫院就診，診斷不詳。 皮疹隨身體生長而增大。既往無視物模糊、關節腫脹畸形或疼 痛、黑便或抽搐史，也無右手掌外傷或手術史。父母非近親
馬凡綜合癥的病因
本病呈常染色體顯性遺傳，在人體很多組織如心內膜心瓣膜、大血管、骨骼等處，均有硫酸軟骨素A或C等黏多糖堆積，從而影響了彈力纖維和其他結締組織纖維的結構和功能，使相應的器官發育不良及出現功能異常、Abraham等(1982)提出，主動脈彈性蛋白有異常，橋粒蛋白和異橋粒蛋白減少，而賴氨酰殘基相應增加，
蛋白纖維的染色原理
正負電相互吸引的離子鍵結合。有酸性染料、活性染料、直接染料和陽離子染料。 蛋白質纖維上含有氨基酸所有特有的氨基正離子和羧基負離子。不管是陽離子染料還是陰離子染料，都能通過離子鍵來與蛋白質纖維相互吸引結合。陰離子型的染料，如活性、直接、酸性染料，就跟纖維大分子上的氨基正離子結合；陽離子染料，就跟
蛋白質染色介紹
染色液種類繁多，各種染色液染色原理不同，靈敏度各異。使用時可根據需要加以選擇。常用的染色液有：1．氨基黑10B(amino black 10B又稱為amidoschwarz 10B或naphthalene blueblack，2B 200)氨基黑10B分子式為C22H13N6S3Na3，MW=7
蛋白質凝膠染色法實驗
實驗步驟 總蛋白質的檢測 1. 總蛋白質色度法染色 簡便的目視檢測、相對簡單的使用及廣大熟悉方法的用戶基礎群，使得考馬斯亮藍(C B B )—直是最普遍使用的總蛋白質凝膠染色劑。如需要比考馬斯亮藍染色更高的檢測敏感度，那么銀
蛋白質凝膠染色法實驗
實驗步驟總蛋白質的檢測1. 總蛋白質色度法染色簡便的目視檢測、相對簡單的使用及廣大熟悉方法的用戶基礎群，使得考馬斯亮藍(C B B )—直是最普遍使用的總蛋白質凝膠染色劑。如需要比考馬斯亮藍染色更高的檢測敏感度，那么銀染法是可選擇的色度方法。如果需要對切下的蛋白質進行質譜分析，則首選不會引入共價蛋白
蛋白質染色實驗——銀染法
實驗材料蛋白質試劑、試劑盒脫色液戊二醛硝酸銀洗印顯影液儀器、耗材培養箱搖床實驗步驟1. ?將聚丙烯酰胺凝膠放在塑料容器并以5倍體積的固定液覆蓋，在旋轉搖床中緩慢搖動30 min 以上。?2. ?傾去固定液，加5倍凝膠體積的脫色液，緩慢搖動60 min 以上。?3. ?傾去脫色液，加5倍凝膠體積的10
糖類染色實驗——羊水角化鱗狀上皮的角蛋白染色
實驗方法原理產婦分娩時引起羊水栓塞和胎兒娩出的羊水吸入角化鱗狀上皮（角蛋白）以及其他物質，這種角蛋白含有豐富的二硫鍵結構，從糖的分類上屬于強硫酸成分的酸性黏多糖，而黏液物質屬于中性黏液物質呈紅色，酸性黏液物質呈藍色。弱硫酸成分的酸性黏多糖，在肺組織中同時可見兩種物質，常用阿爾辛藍、熒光桃紅染色法。實
染色質蛋白非組蛋白的介紹
非組蛋白主要是指與特異DNA序列相結合的蛋白質,所以又稱序列特異性DNA結合蛋白（sequence specific DNA binding protein)。利用凝膠延滯實驗（gel retardation assay）,可以在細胞抽提物中進行檢測。首先制備一段帶有放射性標記的已知特異序列的D
結締組織染色實驗——結締組織三色染色法
實驗方法原理結締組織中含有大量的細胞間質纖維和基質組分，主要成分為蛋白和多糖，常用 Masson 染色方法。實驗材料石蠟組織切片試劑、試劑盒酸性復紅麗春紅橘黃 G乙酸冰醋酸磷鉬酸亮綠實驗步驟Masson 染色液：酸性復紅 1 g，麗春紅 1 g，橘黃 G 2 g，0.5％ 乙酸 100 ml。亮綠染
關于膠原、明膠和膠原蛋白的異同
《英漢化學化工詞匯》（第3版 科學出版社，1988）中將collagen譯為膠原（蛋白），通常稱為膠原，有時候為了敘述上的方便或更強調其蛋白的特性，也把collagen稱作膠原蛋白。日本“長效寡肽”類膠原是指動物組織器官中存在的一類蛋白質，在提取、分離時，隨著方法和條件的不同，可以產生膠原、明膠
蛋白質凝膠染色法實驗（二）
關鍵步驟通常如下所述。(1) 固定凝膠，以固定蛋白質條帶，并移除凝膠中的干擾物質, 如 S D S 、緩沖液和鹽，這些物質會結合銀并造成背景染色。(2) 用能夠結合蛋白質并提高銀結合能力的物質, 或是能夠干擾剩余未結合的銀造成的背景染色的物質來孵育凝膠。總之，這些各種各樣的方法都和敏化作用有關。(3
蛋白質凝膠染色法實驗（四）
(3) 用 10% 〇 //V ) 甲醇、7 % ( V /V ) 乙酸進行簡單的凝膠脫色。利用基于微波爐的方案可以加快染色過程的進行。 SYPRO R uby 蛋白質凝膠染料具有相對較高的消光系數和量子產率，因此它十分亮眼, 化學穩定性和光穩定性都很高。光譜的激發可借助紫外線或是藍光光源;
蛋白質凝膠染色法實驗（一）
總蛋白質的檢測1. 總蛋白質色度法染色簡便的目視檢測、相對簡單的使用及廣大熟悉方法的用戶基礎群，使得考馬斯亮藍(C B B )—直是最普遍使用的總蛋白質凝膠染色劑。如需要比考馬斯亮藍染色更高的檢測敏感度，那么銀染法是可選擇的色度方法。如果需要對切下的蛋白質進行質譜分析，則首選不會引入共價蛋白
蛋白質凝膠染色法實驗3
糖蛋白的檢測1. 通用糖蛋白檢測糖 基 化 是 真 核 細 胞 中 最 常 見 的 蛋 白 質 翻 譯 后 修 飾 。寡 糖 通 常 連 接 于 天 冬 酰 胺 側 鏈(iV-連 接 糖 基 化 ) 或 絲 氨 酸 和 蘇 氨 酸 羥 基 側 鏈 (〇 連 接 糖 基 化）。凝 膠 中 蛋 白 質
蛋白質染色實驗——快速銀染法
實驗材料蛋白質試劑、試劑盒甲醛固定液硫代硫酸鈉干膠液甲醇儀器、耗材搖床透析膜實驗步驟1. 將凝膠置于塑料容器中，加入50 ml 甲醛固定液，在旋轉搖床中緩慢搖動10 min。?2. ?傾去固定液，用水冼兩次，每次5 min，緩慢搖動。?3. ?傾去水，凝膠浸泡在0.2 g/l 硫代硫酸鈉溶液中1 m
核酸染色實驗——核仁組成區嗜銀蛋白
實驗方法原理核仁組成區是 DNA 的襻，具有核糖體基因（rDNA），在一定條件下可用銀反應法進行定位，是通過銀的聚合物沉積于胱氨酸和半胱氨酸的雙硫鍵位置上，所以在鏡下能夠清楚可見顆粒狀的核仁組成區嗜銀蛋白（AgNOR）。實驗材料石蠟組織切片試劑、試劑盒二甲苯無水乙醇中性樹膠蒸餾水明膠粉雙蒸水硝酸銀儀