腫瘤醫院團隊發現預測食管癌淋巴結轉移液體活檢標志物

食管鱗狀細胞癌（ESCC）是世界范圍內最常見的致命惡性腫瘤之一，在包括中國在內的東亞地區尤為常見。ESCC惡性程度較高、預后較差，5年生存率為15%-25%[1]。

對于T1期ESCC患者而言（TNM分期，T指的腫瘤的分期，腫瘤只侵到黏膜叫做T1期），發生遠處轉移的可能性大小是決定ESCC患者預后情況的重要因素，也很大程度上決定了醫生將采取何種治療手段：轉移風險低的患者更傾向于選擇內鏡切除，而轉移風險高的患者則更傾向于選擇食管切除術以及放化療[2]。

目前T1期ESCC患者的治療策略選擇

因此，確定遠處轉移的可能性對于T1期ESCC患者來說至關重要，篩選T1期ESCC患者腫瘤轉移相關的生物標志物可以幫助確定其發生淋巴結轉移（LNM）的風險，并幫助醫生選擇合理的個體治療方法，以避免過度治療和治療不足。但是，目前尚無可靠的臨床病理或分子預測方法可用于預測患者的LNM情況。

近日，由中國醫學科學院腫瘤醫院宋詠梅、詹啟敏和呂寧領銜的研究團隊，在著名期刊BRITISH JOURNAL OF CANCER發表了一項重要研究成果。

他們發現了一種預測T1期食管鱗狀細胞癌患者的淋巴結轉移風險的液體活檢標志物——血清miR-20b-5p，還基于miR-20b-5p和病理診斷構建了全新的風險分層模型[3]，為T1期ESCC患者LNM的微創或無創診斷提供了新的標志物，給患者診斷和治療提供了新思路。

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研究人員首先對30份T1期ESCC患者的福爾馬林固定石蠟包埋的腫瘤樣本進行了miRNA陣列分析，最終確定了5個miRNAs在LNM組中高表達：miR-203-5p、miR-27a-3p、miR-20b-5p、miR-224-3p、miR-224-5p。

T1 ESCC患者腫瘤組織中與LNM相關的5個miRNA

隨后，研究人員在驗證隊列的腫瘤組織樣本中評估了各候選miRNA的表達量，結果發現驗證隊列1中miR-20b-5p、miR-224和miR-27a-3p與LNM顯著相關。而在驗證隊列2中，只有miR-20b-5p與LNM顯著相關。

T1期ESCC患者腫瘤組織中miR-20b-5p表達量與LNM相關

根據Youden指數相關截斷值進行分類后，在驗證隊列1中根據miR-20b-5p表達水平預測T1期ESCC患者LNM的敏感性、特異性和AUC分別為97.0%、88.7%和0.958；在驗證隊列2中根據miR-20b-5p表達水平預測T1期ESCC患者LNM的敏感性、特異性和AUC分別為84.0%、58.1%和0.705。

因此，研究人員初步得出結論：T1期ESCC患者的福爾馬林固定石蠟包埋的腫瘤組織中miR-20b-5p表達水平與LNM相關。

為了進一步驗證miR-20b-5p表達量與T1期ESCC患者LNM的相關性，研究人員還對T1期ESCC患者的血清樣本進行了轉錄組測序分析，初步結果顯示有62個miRNAs在LNM組中高表達，但是在綜合分析發現隊列和發現隊列的測序結果后，他們發現只有miR-20b-5p在福爾馬林固定石蠟包埋的腫瘤組織樣本和血清樣本中均上調。

那么血清miR-20b-5p到底能否作為T1期ESCC患者LNM的活檢標志物呢？為了回答這個問題，研究人員首先測定了LMN陽性T1期ESCC患者和LMN陰性T1期ESCC患者miR-20b-5p的血清表達水平，結果發現血清中miR-20b-5p水平預測LNM具有較好的敏感性和特異性，其敏感性和特異性分別為73.5%和95.4%。

血清miR-20b-5p作為T1期ESCC患者LNM的標志物的評估

在多變量邏輯回歸分析中，研究人員用ESCC的三個獨立顯著預測因子（miR-20b-5p、淋巴管浸潤和侵襲深度）預測LNM的列線圖一致性指數為0.931。但是，從ROC曲線可以看出，相比于淋巴管浸潤（LVI）和侵襲深度，miR-20b-5p預測T1期ESCC患者LNM的效果更好，其AUC為0.827，而淋巴管浸潤預測T1期ESCC患者LNM的AUC為0.751，侵襲深度預測T1期ESCC患者LNM的AUC僅為0.662。

除此之外，研究人員還探究了同一患者不同樣本的miR-20b-5p表達水平，結果發現同一個體腫瘤組織樣本和血清樣本表達miR-20b-5p的水平呈顯著正相關，說明血清中miR-20b-5p水平可反映其組織表達水平。因此研究人員得出結論：血清miR-20b-5p可以作為T1期ESCC患者LNM的液體活檢標志物。

血清miR-20b-5p可作為T1期ESCC患者LNM的活檢標志物

先前有研究發現ESCC患者血清中miR-20b-5p的表達水平明顯高于健康人群，相比于早期ESCC患者，miR-20b-5p在晚期（III期和IV期）患者中的表達水平明顯更高[4]。與上述結果相一致，本研究統計的生存曲線也顯示血清miR-20b-5p水平較高的T1期ESCC患者無病生存期明顯較差（P<0.001），再次佐證了血清miR-20b-5p作為T1期ESCC患者LNM的液體活檢標志物的可行性。

基于上述發現，研究人員設計了一種基于血清miR-20b-5p水平的活檢和/或內鏡切除后T1期ESCC治療策略的風險評估模型：在活檢證實為ESCC的患者中，如果內鏡檢查和CT對比掃描確認腫瘤為T1期，且沒有LNM的證據，那么可以根據腫瘤浸潤深度、血清miR-20b-5p水平和淋巴血管侵犯程度對LMN風險進行評分，如果風險較低，則建議患者行內鏡切除；內鏡切除后，對切除樣本進行病理檢查即可獲得準確的腫瘤浸潤深度和淋巴血管侵犯程度，然后根據預處理樣本的血清miR20b-5p水平，以及確切的浸潤深度和淋巴血管侵犯程度再次對LNM的風險進行評分，低風險患者就不需要額外的治療。

基于血清miR-20b-5p水平的T1期ESCC治療策略的風險評估模型

總而言之，這項研究為T1期ESCC患者LNM的微創或無創診斷提供了一個新的標志物——miR-20b-5p，為T1期ESCC患者選擇治療策略和預測預后情況提供了一個全新的參考。