由于色譜技術具有快速、正確、高效的特點,故得到廣泛地應用。近幾年來的有關報道,反映了我國色譜理論研究和色譜應用取得了很大成就。如在制藥工業、生物化學、石油化工、冶金工業、環保、農藥、食品等領域,色譜技術已成為廣泛使用的分離和分析手段之一。
化學試劑是分析儀器的一個重要組成部分,它用量雖然很少,但作用難以用文字表述,它同分析儀器的好壞一樣,關系到分析結果的成敗。色譜試劑在化學試劑中占較大比例,它與色譜儀器、分析方法等因素有著密切的關系。隨著色譜的新技術、新方法、新要求的不斷出現,現有的色譜試劑已遠遠不夠。
由于在色譜儀器設備、色譜柱和軟件方面得到了發展,目前已有許多地方采用了國際標準方法,外商機構也積極推廣其先進技術。由于國內科研力量雄厚,許多科學工作者研制了相應的專用填充柱和毛細管柱,也發展了新的色譜試劑供應品種。從色譜技術的應用來看,色譜試劑有較大的發展余地。目前,用于色譜中的試劑商品主要有以下幾種。
1 氣相色譜的固定相
常用的填料如擔體、硅藻土、多孔小球及分子篩系列等。越是分析常用的品種,國產化程度越高。也有經過預處理的酸洗或酸洗硅烷比擔體和已涂漬了固定液的固定相,如chromsorb、porarak和HayeSep等系列,這些大部分是進口的。對不同要求的色譜柱,固定相應選擇相應的目數以達到較理想的分離分析目的。隨著色譜柱的發展和變化,尤其是毛細管柱的廣泛應用,選擇使用色譜固定液也相應減少。如國產的毛細管電泳儀器正逐步向國際水準靠攏,實現全過程自動化。各種可用于核酸、蛋白、離子和手性藥物分析的應用試劑盒的開發,也減少了對常用試劑的需求。目前,常用的固定液有甲基硅油、硅酮OV系列、聚乙二醇系列、苯二甲酸酪系列和Carbowax系列以及還有一些有機硅改性試劑和手性固定液。色譜標準品與參考物質,其含量通常大于99.5%,有從單一分子到多組分的石油、環保、農藥殘留物等等標準樣品,以上這些試劑進口的多一些。就氣相色譜儀總體而言,國外的儀器更趨向于自動化、微機化;國內的儀器則趨向于專用化和系列化,這對試劑提出了更高的要求。
2液相色譜試劑
使用最多的流動相試劑有甲醇、乙腈、丙酮、四氫映哺、異丙醇、正己烷、異辛烷和氯仿等。流動相的多項技術指標,如含量、光吸收區、酸堿度、粘度、水分以及顏色、熒光背景和LC梯度穩定性等關系到色譜柱的使用壽命和測試結果的好壞。液相色譜儀新型號不多,以HPILC儀為主。近年來毛細管電泳的發展對離子色譜的沖擊很大,事實上,離子色譜(IC)與交換色譜(EC)這兩種不同的分析技術各有優缺點,二者不可能完全取代對方。使用離子色譜的金屬離子分析中,高純試劑仍有一定的用量,不過,其品種、規格、價格等變化較大。另外,國外試劑目錄新編的用于HPLC的離子對試劑也不少。與HPLC相關的試劑,其主要問題是每個品種需求量不多而質量要求高,如果選用進口品種,則價格不低。
3 超臨界流體色譜和超臨界流體萃取系統、中低壓層析和貫流色譜
這些色譜是較新型高效液相色譜系統。SFE主要是單純使用CO2作萃取劑,若加入其他有機溶劑作為改性劑,效果會更好。貫流色譜是以貫流填料這一專利為基礎的。該技術以高交聯度的聚乙烯二乙烯苯為基質,經適當處理后獲得了雙模式孔結構,使介質具有擴散孔及貫穿孔。在分離過程中,流動相可直接貫穿介質顆粒。基于上述貫流色譜填料,利用現有液相色譜填料表面鍵合技術,鍵合帶有不同官能團的色譜配基,可獲得反相、離子交換、疏水和親和等多種模式色譜填料,以分離各種不同類型的樣品。展望該技術的發展,我們可以看到不僅是聚乙烯二乙烯基苯可作貫流色譜基質,具超大孔和貫穿孔的硅膠、葡聚糖、纖維素及濾膜等均可能作為類似原理的分離介質。因此,隨著生物科學、生物工程和制藥工業發展的需要,這類新型的快速色譜填料必將會進一步發展。
4 薄層色譜
薄層色譜常用的有硅膠和帶熒光的硅膠薄板、微晶纖維素、氧化鋁和聚酰胺。經過化學處理后,如帶NH2、AC、CM、DEAE等基團,可用作反相薄層色譜。
有些試劑目錄還整理出了與GC、HPLC相關聯的試劑,如氣相色譜前處理試劑;用作硅烷化、酰化、酪化和烴化等的試劑;用于HPI'C的標記試劑,如紫外光、熒光及化學發光檢測用試劑、光學純度測定用試劑和NMR等儀器分析用試劑。
色譜試劑是為儀器分析服務的。隨著科學技術水平不斷發展提高,各種分析儀器和檢測方法的更新改進,對色譜試劑的需求必將有更大的變化。
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