做好一項實驗,好的實驗設備是少不了的,尤其是現如今大部分實驗室經費都還充足的情況下,以下是蛋白質純化常用到的實驗設備,僅供參考。
(1)、超聲波細胞破碎機
適用于5-100g濕菌體超聲破碎,實驗室規模用。一般可選擇直徑10、15、20mm的超聲探頭。推薦國產機器為寧波新芝。
(2)、高壓勻漿機
大規模生產用,對菌體量無限制。破菌效果好,但要注意冷卻。
(3)、高分散乳化機
均勻懸浮菌體用,比攪拌快,均勻性好,特別適合于大規模生產。另外,大規模生產時緩沖液的配制很有用,可快速溶解、混勻。推薦品牌:IKA 國產品牌:FLUKO;
(4)、中空纖維超濾柱
大規模生產時做菌體收集用,要配合大蠕動泵及壓力表。
(5)、高速冷凍離心機
小試、中試菌體收集用,破菌后離心,包涵體溶解后離心、小規模離心超濾等。推薦品牌:BECKMAN、日立、Eppendorf
(6)、磁力攪拌器
就是攪拌用了。緩沖液配制,包涵體溶解等。推薦品牌:國產的都行,zui好配4或6工位的。
(7)、真空泵
離心上清過濾、緩沖液過濾、樣品過濾等。推薦品牌:Millipore WP61型。
(8)、過濾器
同真空泵配合使用。推薦品牌:Sartorius燒結金屬墊板的不銹鋼50mm濾器。
(9)、pH計
緩沖液配制、樣品pH調節用。推薦品牌:梅特勒
(10)、電導儀
就是測定緩沖液及樣品的電導了。
(11)、純水儀
如果沒有管道系統的純水設備,那就必需要的了。至少也是要去離子水、雙蒸水或三蒸水。推薦品牌:MINI Q
(12)紫外可見分光光度計
測定蛋白濃度。推薦品牌:Beckman,島津
(13)、核酸蛋白檢測儀
純化時在線監測。如果不是用AKTA、Bio-Rad之類的高級儀器,就必須要了。
(14)、蠕動泵
簡單純化系統用、包涵體稀釋復性。推薦品牌:蘭格、GE公司P50。
(15)、純化系統
高級的純化系統了。推薦品牌:AKTA explorer、AKTA Purifier。不推薦bio-rad的DUOFLOW。
(16)、膜超濾器
蛋白樣品濃縮、緩沖液置換、以及藥品級蛋白純化時緩沖液的去內毒素用。推薦品牌:Millipore Labscale、Pellicon(泵可用國產的蘭格)
(17)、蛋白電泳儀
SDS-PAGE、Westblot用。推薦品牌:Bio-Rad。
(18)、脫色搖床
電泳染色、脫色用。
(19)、制冰機
破菌時冷卻用。
(20)、恒溫培養箱
融合蛋白酶切去除tag時恒溫用,做ELISA時用。
(21)、凝膠成像儀
就是給電泳膠及WB拍照片用,要配照片打印機哦。就是一臺數碼相機,硬件各品牌沒有本質差異,主要看那家的軟件做的好,界面友好。
(22)、電磁爐
加熱電泳樣品。
(23)、微波爐
電泳考染脫色。加熱水,溶解尿素、硫酸銨等。
(24)、微量取樣器
就是槍了。從1ul到5ml都要的。還有一種電動的,可以用刻度吸管。推薦品牌:Gilson,eppendorf
(25)超凈工作臺
做蛋白樣品的無菌過濾用。
(26)、冰箱
不說了。
(27)、電風扇
小量樣品的濃縮風干。
(28)、電子天平
稱重了。兩種精度:0.1mg和0.01g。推薦品牌:梅特勒
(29)、空調
這個我相信大家都不會反對,也是蛋白純化對環境的要求。
(30)、超聲波清洗機
緩沖液脫氣用,當然也可以采用真空泵抽真空的方法。特別是做疏水層析時,有機溶劑與水相混溶時脫氣。
(31)、酶標儀、洗板機
測定蛋白質免疫活性用。特別當我們純化的蛋白原料含量很低時,SDS-PAGE無法有效監測就必須應用Elisa方法。
(32)、恒溫干燥箱、干烤箱
恒溫干燥箱用于玻璃器皿、一般塑料件洗滌后的干燥,設定溫度40-60度。
干烤箱用于干烤滅菌,內毒素去除等,設定溫度180-220度。
(33)、酸缸
就是做細胞培養常用的那種浸泡容器的東東,對藥品級的蛋白純化要求容器都要用酸缸泡過。
(34)、UPS電源
保護層析設備,防止數據丟失。
(35)、層析冷柜 低溫冷室
4度雙門的那種大冷柜,可以把層析柱放進去,對溫度敏感的蛋白純化需要。
冷室作用同上,更徹底,只是運行費用更大。
(36)、冷凍干燥機(器)、
蛋白質保存較佳的方案。從手提式到藥廠的大規模凍干室形式多樣。
3日,記者從南京中醫藥大學獲悉,該校醫學院朱家鵬教授和耶魯大學張凱教授聯合研究團隊突破了蛋白質純化的傳統概念,直接以線粒體成像,首次實現了線粒體原位膜蛋白的高分辨結構解析,得到呼吸鏈超級復合體的最真實......
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蛋白質純化與結晶的技術應用蛋白質純化與結晶的原理 獲得蛋白質的晶體結構的*個瓶頸,就是制備大量純化的蛋白質(>10mg),其濃度通常在10mg/ml以上,并以此為基礎進行結晶條件的篩選......
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