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  • 發布時間:2019-09-13 15:31 原文鏈接: 融合蛋白化學降解實驗

    • 基本方案

    • 備選方案1

    • 備選方案2

               

    實驗材料

    融合蛋白

    試劑、試劑盒

    CNBr 甲酸 SDS

    儀器、耗材

    離心機 分光光度計 水浴鍋

    實驗步驟

    1.  進行預試驗以確定最短溫育反應時間。凍干兩小份50 μl 的融合蛋白溶液,將其中一份重懸于5050 μl 50 mg/ml CNBr/甲酸中,另一份重懸于50 μl 含CNBr 的70%甲酸中,室溫下反應。


    2.  在0、8、24及48 h 的時刻,各取5 μl 并凍干。

     

    3.  往所有凍干樣本加20 μl 1×SDS樣品緩沖液,煮沸10 min,加樣于SDS-聚丙烯酰胺凝膠。

     

    4.  分析凝膠電泳結果以確定完全裂解蛋白所需的最短溫育反應時間。


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