血清知識大盤點（二）

其他動物血清

10、馬血清

10%馬血清可代替FBS用于支持SRBC的體外抗體應答, 常與牛血清結合或單獨作為哺乳動物細胞培養的補充培養基。

11、豬血清

豬血清在染色體研究中表現非常出色，可用于淋巴細胞培養, 疫苗生產（生產支原體）, 中和脂質體包裹的腺相關病毒（AAV）, 用于誘導大鼠肝纖維化, 作為酶聯免疫吸附試驗（ELISA）中的標準陰性參考。

12、兔血清

正常兔血清可作為免疫分析的阻斷劑和對照。在免疫組織化學和免疫細胞化學方面，各種研究均采用20%或1:200稀釋兔血清作為阻斷劑。

13、羊血清

• 用于生物醫學研究的大多數細胞系和原代培養物上，FBS的合適替代物，病毒分離和鑒定，病毒學研究。

• 用作魚類細胞培養的有效NBCS替代物。

• 可成功地代替胎牛血清在生長培養基中長期用于環孢蘑菇的體外繁殖。

胎牛血清成分已知的已有上千多種，以下為主要成分表：

各位老師可以根據自己的實驗需求選擇不同的血清。

★ 我們同時為您收集了一些使用血清時的典型問題：
 

01、血清的顏色如何？

為何有的胎牛血清顏色偏紅，而有的偏黃？是因為胎牛血清顏色是由血紅蛋白（鮮紅）和膽紅素（黃）決定的，主要是受血紅蛋白影響。血紅蛋白含量很低時，含少量膽紅素，呈淡黃或金黃。血紅蛋白含量高時，會呈現淡紅色。

需要長期保存的血清必須儲存于-20℃冰箱（未開封血清有效期為5年）。若存放于4℃，請勿超過1個月，若一次無法用完一瓶，建議將血清無菌分裝并冷凍。
 

02、血清如何解凍，使用前是否需要過濾？

血清解凍需采用逐步解凍法：將血清從-20℃冰箱放入4℃冰箱中溶解一天，然后移入室溫，待全部溶解后再分裝。在溶解過程中需不斷輕輕搖晃均勻（小心勿造成氣泡），減少沉淀生成。切勿直接將血清從-20℃轉入37℃解凍，這樣因溫差較大易造成蛋白質凝結并出現沉淀。
 

本公司血清在ISO13485認證的廠房中生產，經過3次0.1μm過濾，出廠經過檢測并且會使用三種以上的細胞株進行培養測試及無菌檢測，污染幾率非常非常非常（重要的事情說三遍）低。通常細胞污染有非常多的可能性，根據協助使用者進行分析檢測，結果表明絕大部分都是因人為操作失誤導致污染。因此買來的血清不需要再次進行過濾。
 

下圖為人肉眼和光學顯微鏡所能觀察到的微粒大小。由于我們的血清是經過3次0.1μm過濾，因此若肉眼可以觀察到異物時，可以考慮：
 

• 是否血清溶解后蛋白質凝集

• 是否操作時導入污染物
   

03、為什么血清中會有沉淀生成，主要成分是什么，會對實驗有什么影響？

血清中沉淀主要有：纖維蛋白（絮狀沉淀），胎球蛋白^[1]，脂蛋白，冷凝集素，玻連蛋白，磷酸鈣（顯微鏡下小黑點沉淀），膽固醇等。

原因：造成沉淀的主要原因是溫度的改變。熱滅活，反復凍融，長期儲存于2-8℃或者室溫。

預防：非必要，不用熱滅活；避免反復凍融；-20℃保存；4℃全融（期間間斷搖晃均勻）；2000rpm離心5分鐘(不建議用0.2um濾膜過濾） ，取上清使用。
 

BI原廠鏈接：http://www.bioind.com/support/product-faqs/fbs-faqs/

美國ATCC：https://www.atcc.org/
 

04、黑膠蟲是來源于血清嗎？

目前科學界對黑膠蟲的身份并無定論, 通常是顯微鏡下觀察到密密麻麻的小黑點在培養基中自主游動，就稱為黑膠蟲污染。本公司技術服務部”Dr.Cell” 目前檢測的數十個所謂”黑膠蟲”樣本，其中62%為細菌（如Sphingomonas paucimobilis，Blastomonas natatoria strain），38%為支原體（如：Mycoplasma hyorhinis，Mycoplasma pulmonis strain）。黑膠蟲在鏡下的典型特征呈卵圓狀、球狀、桿狀等，可引起細胞生長遲緩或裂解凋亡。目前沒有充分的數據表明黑膠蟲來源于血清，因為其尺寸遠大于血清過濾時所用的0.1微米(μm)濾膜。建議各位老師通過使用三抗（Cat#: 03-032-1B）外加支原體處理試劑（Cat#: 03-038-1B）嘗試殺滅黑膠蟲。
 

05、血清存在批間差嗎？

因為血清來源于動物，其組成成分有1000種左右，且血清組成及含量常隨供血動物的性別、年齡、生理條件和營養條件不同而異。每個批號的組分和百分比含量都是不固定的，所以批間差異是存在的。

建議先進行批號測試，篩選出合適批號，購買半年甚至一年以上的用量，避免批間差造成實驗波動（胎牛血清在-20℃保存可達5年）。