作為ELISA的最后一步,檢測結果的計算對整個實驗十分重要。
以夾心法為例。
1. ELISA的樣本通常要設置1~2個復孔進行檢測,分別求出標準品、實驗組樣本的吸光度的平均值。單個樣本的檢測值不應超出平均值的20%。
2. 樣本的OD(吸光度)平均值要減去標準品濃度為0時的OD平均值。
3. 建立標準曲線
在對數坐標圖上擬合四參數的邏輯函數曲線(X軸上為標準品濃度,Y軸為對應的OD值)。推薦使用origin軟件。
詳細步驟如下:
第一步: 輸入OD值和標準品濃度
第二步:選擇擬合曲線類型
選中輸入的數值框,按如下操作依次點擊選項。


第三步:勾選“find specific X/Y”

完成上述操作后,點擊Fit按鍵,擬合曲線和相關信息將自動生成(如第四步所示)
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