質粒DNA的小量制備實驗

DNA

葡萄糖 Tris EDTA TE NaOH SDS 乙酸甲 乙醇

離心機 漩渦混合器 分光光度計

1.  接種一個單菌落于5 ml 無菌LB培養液中，在37℃培養至飽和狀態（OD₆₀₀≈4）。

2.  取1.5 ml 培蕎液離心20 s 沉淀用100 ul 溶液重懸并于室溫靜置5 min。

3.  加入200 ul NsOH/SDS溶液，混勻。于冰上放置5 min。

4.  加入150 ul 乙酸鉀溶液，在旋渦混合器上搌蕩2 s，于冰上放置5 min。

5.  離心3  min然后吸取0.4 ml 上清液移入干凈的微量離心管中，加0.8 ml  95%乙醇，于室溫靜置2 minI。

6.  室溫離心3 min ，用1 ml 70%的酒精清洗沉淀，然后真空干燥。

7.  沉淀用30 ul TE緩沖液重溶，保存，取2.5~5 ul進行酶切分析。