超微量分光光度計的新選擇

　　摘要： 無需比色皿或毛細管等耗材，只要1ul樣品即可檢測核酸濃度和純度，細胞濁度，蛋白A280，BCA，Bradford檢測，熒光檢測，最近有哪些新選擇?

　　檢測核酸或者蛋白樣品濃度是最常用的實驗操作之一，傳統比色皿體積大，需要稀釋較多樣品，造成珍貴的核酸蛋白樣品浪費，而且還要反復清洗比色皿，甚煩。好在有超微量分光光度計的出現。早在2004年生物通就已經大力推薦過基因有限公司引進的NanoDrop微量分光光度計，這種技術利用微量液體張力牽引形成光通路，從而替代比色皿，極具創新性和實用性，并得到2004年年度產品儀器類的創新大獎。這種首創無需比色皿稀釋，只要1ul樣品溶液即可直接檢測核酸/蛋白/或者細胞濃度的新型分光光度計很快在國內科研用戶中得到非常熱烈的認同。

　　并非僅僅是個概念。Nanodrop ND-1000的高吸收光檢測能力相當50倍于傳統分光光度計，使得多數樣本不需要稀釋即可進行全光譜(220nm-750nm)檢測，無需消耗品，即插即用無需預熱，操作極為方便。可以進行核酸定量和純度檢測，蛋白A280檢測，Bradford檢測，蛋白BCA檢測，細胞濁度檢測等多種紫外/可見光檢測。Nanodrop ND-1000令NanoDrop公司聲名大振而迅速確立來其在超微量分光光度計市場的領導地位。

　　但是對于高通量實驗，不說384孔，就是96孔，這么一個一個的加樣-檢測-清潔下來，不累死也要頭暈眼花的。因此，順應這種需求，NanoDrop公司又推出了NanoDrop ND-8000，可一次同時檢測1-8個樣本，使得檢測速度立刻提升8倍----用8道排槍，只要6分鐘可以檢測96個樣品，而且體積非常緊湊----差不多A4紙大小(32x24cm)。設想看檢測96孔樣品的濃度----可以節省多少樣品，節省多少時間和清洗比色皿的精力阿!新技術真是令人喝彩!

　　Nanodrop延續這個設計理念到熒光信號檢測，推出了ND-3300熒光分光光度計。這個體積只有一本字典大小(20x14x12cm)的儀器卻擁有強大的功能----3組LED(UV365，藍光470和白光500-650)覆蓋 400-750nm全光譜熒光分析，不需更換濾光片，不論是自行研發或市售熒光染劑都可使用，如 PicoGreen、RiboGreen、Hoechst、FITC、Cy3-Alexa555、Cy5-Alexa647, quantum dots等等。只要1.5-2ul樣本量，不需比色皿或者毛細管，無需稀釋樣品，檢測發射光峰值波長的熒光強度和±20nm 相對熒光輸出，通過標準曲線定量。熒光范圍可達10的5次方(0.1nmM-1000nM),采用2048像素CCD檢測，內置濾光片去除395nm以下光波干擾，由于使用三組LED冷光源代替傳統高能耗光源，NanoDrop ND-3300能耗超低----只需要電腦的USB接口供電，根本無需外置電源!

　　NanoDrop ND-3300并不能完全替代傳統掃描熒光分光光度計，也不適合檢測濃度特別低的樣品，其檢測濃度下限是1pg/ul，不如酶標儀和傳統熒光分光光度計。但是NanoDrop ND-3300能檢測樣品物質量卻實在比酶標儀和傳統熒光分光光度計小的多----以 PicoGreen為例，ND-3300可以檢測少至2pg的DNA樣品(2ul，1ug/ul)，酶標儀/讀板機檢測下限50pgDNA樣品(濃度讀數下限以0.25pg/ul為例);傳統分光光度計下限則是25pgDNA樣品(濃度讀數下限0.025pg/ul為例)。所以生物通特別提示你注意“檢測濃度”和“檢測物質量”是不同的概念哦。

　　NanoDrop在快速超微量樣品吸收光/熒光檢測領域帶來的令人耳目一新的變革，新技術可令每個研究人員直接感受到技術進步的愉悅，好用是很好用，這3臺儀器價格不菲。2007年10月賽默飛世爾(Thermofisher)宣布收購Nanodrop公司，并將其產品收歸Thermofisher旗下。

　　現在我們又多了一個新選擇----GE Healthcare公司最新推出都NanoVue超微量分光光度計!這是一款非常容易操作的微量分光光度計，可以用來精確檢測核酸、蛋白和細菌培養液的濃度。只要0.5-5l的樣品加在一種全新設計的樣品板上檢測即可直接得到結果。由于全新的疏水點樣表面使得樣品檢測完之后還可以用Tips直接回收樣品，如果不需要當然也可以簡單擦拭徹底清潔樣品板，減少樣品間交叉污染。檢測時間5秒之內即可完成讀數、出峰識別和檢測峰確認。檢測波長范圍200nm- 1100nm。核酸掃描的可視化功能使得可以檢測樣品中雜質的存在，對于RNA樣品測定非常有用。Press-to-Read功能使得按下檢測鍵后才打開光源檢測，減少光源工作時間延長光源使用壽命。整體光學結構為固定化設計，避免搬動造成光路偏移。

　　NanoVue的設計上內置了很多功能，方便使用者的工作----既然要簡化操作，當然是越方便越好!比如，儀器內置寡核苷酸引物的分析方法，只要鍵入66堿基以下的寡核苷酸序列即可計算獲得轉換因子(ug/ml)，分子量理論吸光度(AU /umol)和理論Tm值。內置多種蛋白定量檢測方法，包括Bradford, BCA, Lowry, Biuret和直接紫外法，最多可支持27個標準樣品制作標準曲線并可以保存。此外，儀器可以自動測定所需光徑也可手動調教以滿足特殊要求。可以單點校正或者多點校正、自選波長測定目標樣品濃度。大面積高分辨率液晶屏上可顯示所有結果，包括標準曲線波長掃描圖像，處處體現方便用戶的宗旨。