酶的提取和分離純化實驗方法

（一）細胞破碎處理

許多酶都存在于細胞內。為了提取這些胞內酶，首先需要對細胞進行破碎處理。細胞破碎的方法很多，主要包括機械破碎法、物理破碎法、化學破碎法和酶學破碎法等。機械破碎法是指利用搗碎機、研磨器或勻漿器等將細胞破碎。物理破碎法是指利用溫度差、壓力差或超聲波等將細胞破碎。化學破碎法是指利用甲醛、丙酮等有機溶劑或表面活性劑作用于細胞膜，使細胞膜的結構遭到破壞或透性發生改變。酶學破碎法是指選用合適的酶，使細胞壁遭到破壞，進而在低滲溶液中將原生質體破碎。

（二）提取

酶 的提取是指在一定條件下，用適當的溶劑處理細胞破碎后的含酶原料，使酶充分地溶解到提取液中的過程。酶的提取方法有過柱法、鹽溶液提取法、堿溶液提取法和有機溶劑提取法等。為了提高酶的提取率和防止酶提取后變性失活，提取過程中必須注意保持適宜的溫度和pH值，并且添加適量的保護劑。

（三）分離

提取液中含有多種酶，要想從提取液中分離純化出某一種酶，必須根據這種酶的特性，選擇合適的分離純化方法。酶分離純化的方法很多，可利用酶相對分子質量的大小進行分離純化，如通過透析的方法分離酶等。