酶聯免疫法測定人堿性成纖維細胞生長因子脂質體的包封率

《分析化學》2008年04期  
 
  酶聯免疫法測定人堿性成纖維細胞生長因子脂質體的包封率
  黃亞東;張宏波;趙文;蘇志堅;曲紅艷;項琪;張卉
  　　建立了一種靈敏的定量檢測人堿性成纖維細胞生長因子(hbFGF)脂質體中hbFGF含量的酶聯免疫(ELISA)方法,應用于測定hbFGF脂質體的包封率。通過用hbFGF標準品溶液包被酶標板,加入特異性的鼠抗人hbFGF抗體(一抗)和山羊抗鼠IgG(二抗),采用多因素棋盤滴定方法確定最佳實驗條件為:一抗濃度200μg/L,二抗濃度50μg/L。本方法的檢出限為0.86μg/L,工作濃度范圍1.0~10μg/L,批內RSD為3.95%~4.27%,批間RSD為4.19%~7.21%,不同操作者批內和批間的RSD分別為6.21%和9.12%,可重復性良好。本方法測定hbFGF脂質體超濾液和氯仿提取液中hbFGF含量分別為(3.325±0.193)μg/L和(18.454±1.063)μg/L,組內RSD分別為4.69%和4.52%。hbFGF脂質體包封率為82.06%。本方法特異性高、重復性好、快速、簡便,可用于hbFGF脂質體包封率及其它含hbFGF制劑的含量測定。
【作者單位】：暨南大學醫藥生物技術研究開發中心 廣州510632(黃亞東;趙文;項琪;張卉);深圳致君制藥有限公司 深圳518029(張宏波;蘇志堅);南海朗肽制藥有限公司 佛山528222(曲紅艷)
【關鍵詞】：酶聯免疫法;人堿性成纖維細胞生長因子;脂質體;包封率
【基金】：國家自然科學基金(No.30670541);廣東省科技攻關項目(No.2004B10401019);廣東省科技攻關計劃項目(No.2004A10902006)資助
【分類號】：R94
【DOI】：CNKI:SUN:FXHX.0.2008-04-031
【正文快照】：
　　1引言人堿性成纖維細胞生長因子(human basic fibroblast growth factor,hbFGF)是一個由146個氨基酸組成的陽離子多肽(分子量16~18kD,等電點為9.6),廣泛分布在體內各組織器官中。hbFGF是一種很強的絲裂原,具有促進各種軟組織損傷修復、加速肌肉及毛細血管的生長分化和神經組織